Célula madre pluripotente inducida
Célula madre pluripotente generada directamente a partir de una célula somática

Imagen de microscopio confocal de una colonia de células madre pluripotentes inducidas humanas derivadas de un paciente con albinismo oculocutáneo . El rojo indica el factor de transcripción Oct-4 , el verde la proteína SSEA4 y el azul los núcleos de las células .
Colonias de células iPS humanas. Las células fusiformes del fondo son fibroblastos de ratón. Solo las células que componen la colonia central son células iPS humanas.

Las células madre pluripotentes inducidas (también conocidas como células iPS o iPSC ) son un tipo de células madre pluripotentes que se pueden generar directamente a partir de una célula somática . La tecnología de las iPSC fue desarrollada por Shinya Yamanaka y Kazutoshi Takahashi en Kioto , Japón , quienes juntos demostraron en 2006 que la introducción de cuatro genes específicos (denominados Myc , Oct3/4 , Sox2 y Klf4 ), conocidos colectivamente como factores Yamanaka, que codifican factores de transcripción , podrían convertir células somáticas en células madre pluripotentes. [1] Shinya Yamanaka recibió el Premio Nobel de 2012 junto con Sir John Gurdon "por el descubrimiento de que las células maduras pueden reprogramarse para volverse pluripotentes". [2]

Las células madre pluripotentes son prometedoras en el campo de la medicina regenerativa . [3] Debido a que pueden propagarse indefinidamente, así como dar origen a todos los demás tipos de células del cuerpo (como neuronas, células cardíacas, pancreáticas y hepáticas), representan una fuente única de células que podrían usarse para reemplazar las que se pierden por daños o enfermedades.

El tipo más conocido de célula madre pluripotente es la célula madre embrionaria . Sin embargo, dado que la generación de células madre embrionarias implica la destrucción (o al menos la manipulación) [4] del embrión en la etapa de preimplantación, ha habido mucha controversia en torno a su uso. Ahora se pueden obtener líneas de células madre embrionarias compatibles con el paciente mediante transferencia nuclear de células somáticas (SCNT). [ cita requerida ]

Dado que las iPSC pueden derivarse directamente de tejidos adultos, no solo evitan la necesidad de embriones, sino que también pueden generarse de manera que cada paciente pueda tener su propia línea de células madre pluripotentes. Estos suministros ilimitados de células autólogas podrían usarse para generar trasplantes sin el riesgo de rechazo inmunológico. Si bien la tecnología de las iPSC aún no ha avanzado hasta una etapa en la que los trasplantes terapéuticos se consideren seguros, las iPSC se están utilizando fácilmente en esfuerzos de descubrimiento de fármacos personalizados y para comprender la base específica de la enfermedad en cada paciente. [5]

Yamanaka nombró a las iPSC con una "i" minúscula debido a la popularidad del iPod y otros productos. [6] [7] [8] [9]

En su seminario Nobel, Yamanaka citó el trabajo seminal anterior de Harold Weintraub sobre el papel de la proteína de determinación de mioblastos 1 (MyoD) en la reprogramación del destino celular a un linaje muscular como un precursor importante para el descubrimiento de las iPSC. [10]

Producción

Esquema de la generación de células madre pluripotentes inducidas (IPS). (1) Aislar y cultivar las células donantes. (2) Transducir los genes asociados a las células madre en las células mediante vectores virales. Los glóbulos rojos indican las células que expresan los genes exógenos. (3) Recolectar y cultivar las células de acuerdo con el cultivo de células madre embrionarias , utilizando células alimentadoras inactivadas mitóticamente (gris claro). (4) Un pequeño subconjunto de las células transfectadas se convierten en células iPS y generan colonias similares a las células madre embrionarias.

Las iPSC se obtienen típicamente introduciendo productos de conjuntos específicos de genes asociados a la pluripotencia, o "factores de reprogramación", en un tipo de célula determinado. El conjunto original de factores de reprogramación (también denominados factores de Yamanaka) son los factores de transcripción Oct4 (Pou5f1), Sox2 , Klf4 y cMyc . Si bien esta combinación es la más convencional para producir iPSC, cada uno de los factores puede reemplazarse funcionalmente por factores de transcripción relacionados, miRNAs , moléculas pequeñas o incluso genes no relacionados, como especificadores de linaje. [11] También está claro que los factores promitóticos como C-MYC/L-MYC o la represión de los puntos de control del ciclo celular, como p53, son conductos para crear un estado celular compatible para la reprogramación de iPSC. [12]

La obtención de iPSC es un proceso lento e ineficiente que suele tardar entre una y dos semanas en el caso de las células de ratón y entre tres y cuatro semanas en el caso de las células humanas, con una eficiencia de entre el 0,01 y el 0,1 %. Sin embargo, se han logrado avances considerables en la mejora de la eficiencia y el tiempo que lleva obtener iPSC. Tras la introducción de factores de reprogramación, las células comienzan a formar colonias que se asemejan a las células madre pluripotentes, que pueden aislarse en función de su morfología, las condiciones que las seleccionan para su crecimiento o mediante la expresión de marcadores de superficie o genes reporteros .

Primera generación (ratón)

Las células madre pluripotentes inducidas fueron generadas por primera vez por Shinya Yamanaka y Kazutoshi Takahashi en la Universidad de Kioto , Japón, en 2006. [1] Plantearon la hipótesis de que los genes importantes para la función de las células madre embrionarias (CME) podrían ser capaces de inducir un estado embrionario en células adultas. Eligieron veinticuatro genes previamente identificados como importantes en las CME y utilizaron retrovirus para entregar estos genes a fibroblastos de ratón . Los fibroblastos fueron diseñados de modo que cualquier célula que reactivara el gen específico de las CME, Fbx15 , pudiera aislarse mediante selección con antibióticos.

Tras la administración de los veinticuatro factores, surgieron colonias similares a las de las células madre embrionarias que reactivaron el marcador Fbx15 y pudieron propagarse indefinidamente. Para identificar los genes necesarios para la reprogramación, los investigadores eliminaron un factor a la vez del conjunto de veinticuatro. Mediante este proceso, identificaron cuatro factores, Oct4, Sox2, cMyc y Klf4, que eran necesarios y, en conjunto, suficientes para generar colonias similares a las de las células madre embrionarias bajo selección para la reactivación de Fbx15.

Segunda generación (ratón)

En junio de 2007, tres grupos de investigación independientes, entre ellos el de Yamanaka, una colaboración entre Harvard y la Universidad de California en Los Ángeles , y un grupo del MIT , publicaron estudios que mejoraron sustancialmente el método de reprogramación, dando lugar a células madre pluripotentes indistinguibles de las células madre embrionarias. A diferencia de la primera generación de células madre pluripotentes, estas células madre pluripotentes de segunda generación produjeron ratones quiméricos viables y contribuyeron a la línea germinal del ratón, logrando así el "patrón oro" de las células madre pluripotentes.

Estas iPSC de segunda generación se derivaron de fibroblastos de ratón mediante la expresión mediada por retrovirus de los mismos cuatro factores de transcripción (Oct4, Sox2, cMyc, Klf4). Sin embargo, en lugar de utilizar Fbx15 para seleccionar células pluripotentes, los investigadores utilizaron Nanog , un gen que es funcionalmente importante en las células madre embrionarias. Al utilizar esta estrategia diferente, los investigadores crearon iPSC que eran funcionalmente idénticas a las células madre embrionarias. [13] [14] [15] [16]

Células madre pluripotentes inducidas humanas

Generación a partir de fibroblastos humanos

En noviembre de 2007, dos grupos de investigación independientes informaron sobre la reprogramación de células humanas a iPSC: Shinya Yamanaka , de la Universidad de Kioto (Japón), que fue pionero en el método original de iPSC, y James Thomson, de la Universidad de Wisconsin-Madison, que fue el primero en obtener células madre embrionarias humanas. Con el mismo principio utilizado en la reprogramación de ratones, el grupo de Yamanaka transformó con éxito fibroblastos humanos en iPSC con los mismos cuatro genes fundamentales, Oct4, Sox2, Klf4 y cMyc, utilizando un sistema retroviral [17], mientras que Thomson y sus colegas utilizaron un conjunto diferente de factores, Oct4, Sox2, Nanog y Lin28, utilizando un sistema lentiviral [18] .

Generación a partir de tipos de células adicionales

La obtención de fibroblastos para producir iPSC implica una biopsia de piel, y ha habido un impulso hacia la identificación de tipos de células que sean más fácilmente accesibles. [19] [20] En 2008, las iPSC se derivaron de queratinocitos humanos, que podrían obtenerse de un solo tirón de cabello. [21] [22] En 2010, las iPSC se derivaron de células de sangre periférica, [23] [24] y en 2012, las iPSC se fabricaron a partir de células epiteliales renales en la orina. [25]

Otras consideraciones para el tipo de célula inicial incluyen la carga mutacional (por ejemplo, las células de la piel pueden albergar más mutaciones debido a la exposición a los rayos UV), [19] [20] el tiempo que lleva expandir la población de células iniciales, [19] y la capacidad de diferenciarse en un tipo de célula determinado. [26]

Genes utilizados para producir células madre pluripotentes inducidas (iPSC)

[ cita requerida ]

La generación de células pluripotentes inducidas depende fundamentalmente de los factores de transcripción utilizados para la inducción.

Se ha identificado que el gen Oct-3/4 y ciertos productos de la familia de genes Sox (Sox1, Sox2, Sox3 y Sox15) son reguladores transcripcionales cruciales que participan en el proceso de inducción, cuya ausencia hace que la inducción sea imposible. Sin embargo, se ha identificado que otros genes, incluidos ciertos miembros de la familia Klf (Klf1, Klf2, Klf4 y Klf5), la familia Myc (c-myc, L-myc y N-myc), Nanog y LIN28 , aumentan la eficiencia de la inducción.

  • Oct-3/4 (Pou5f1) Oct-3/4 es uno de los factores de transcripción de la familia de octámeros ("Oct") y desempeña un papel crucial en el mantenimiento de la pluripotencia. La ausencia de Oct-3/4 en las células Oct-3/4 + , como los blastómeros y las células madre embrionarias, conduce a la diferenciación espontánea del trofoblasto y, por lo tanto, la presencia de Oct-3/4 da lugar a la pluripotencia y al potencial de diferenciación de las células madre embrionarias. Varios otros genes de la familia "Oct", incluidos los parientes cercanos de Oct-3/4, Oct1 y Oct6 , no logran provocar la inducción, lo que demuestra la exclusividad de Oct-3/4 para el proceso de inducción. Schöler demostró que la sobreexpresión de Oct4 durante la reprogramación causa cambios epigenéticos que deterioran la calidad de las iPSC. En comparación con OSKM (Oct4, Sox2, Klf4 y c-Myc), la nueva reprogramación de SKM (Sox2, Klf4 y c-Myc) genera iPSC con un potencial de desarrollo equivalente a las células madre embrionarias, según lo determinado por su capacidad para generar ratones totalmente iPSC a través de la complementación de embriones tetraploides . [27] [28] Las iPSC con mayor potencial de desarrollo también podrían generarse mejorando la dimerización entre Oct4 y Sox2 utilizando un factor Sox quimérico. [29]
  • Familia Sox : La familia Sox de factores de transcripción está asociada con el mantenimiento de la pluripotencia similar a Oct-3/4, aunque está asociada con células madre multipotentes y unipotentes en contraste con Oct-3/4, que se expresa exclusivamente en células madre pluripotentes. Si bien Sox2 fue el gen inicial utilizado para la inducción por Yamanaka et al., Jaenisch et al. y Thomson et al., se ha descubierto que otros factores de transcripción de la familia Sox también funcionan en el proceso de inducción. Sox1 produce iPSC con una eficiencia similar a Sox2, y los genes Sox3 , Sox15 y Sox18 también generan iPSC, aunque con una eficiencia reducida. Velychko et al. diseñaron un factor de superreprogramación quimérico, Sox2-17 o "super-Sox", que mejoró o permitió la generación de iPSC de ratón, humano, mono cynomolgus, porcino y bovino. [29]
  • Familia Klf : Klf4 de la familia Klf de factores de transcripción fue identificado inicialmente por Yamanaka et al. y confirmado por Jaenisch et al. como un factor para la generación de células iPS de ratón y fue demostrado por Yamanaka et al. como un factor para la generación de células iPS humanas. Sin embargo, Thomson et al. informaron que Klf4 era innecesario para la generación de células iPS humanas y de hecho no generó células iPS humanas. Se descubrió que Klf2 y Klf4 eran factores capaces de generar células iPS, y los genes relacionados Klf1 y Klf5 también lo hicieron, aunque con una eficiencia reducida.
  • Familia Myc : La familia Myc de factores de transcripción son protooncogenes implicados en el cáncer. Yamanaka et al. y Jaenisch et al. demostraron que c-myc es un factor implicado en la generación de células iPS de ratón y Yamanaka et al. demostraron que era un factor implicado en la generación de células iPS humanas. Sin embargo, el uso de Thomson et al., Yamanaka et al. de la familia de genes "myc" en la inducción de células iPS es problemático para la eventualidad de las células iPS como terapias clínicas, ya que el 25% de los ratones trasplantados con células iPS inducidas por c-myc desarrollaron teratomas letales .Se ha identificado que N-myc y L-myc inducen en lugar de c-myc con una eficiencia similar.
  • Nanog : en las células madre embrionarias, Nanog, junto con Oct-3/4 y Sox2, es necesario para promover la pluripotencia. Por lo tanto, fue sorprendente cuando Yamanaka et al. informaron que Nanog no era necesario para la inducción, aunque Thomson et al. informaron que es posible generar células iPS con Nanog como uno de los factores.
  • LIN28 : LIN28 es una proteína de unión al ARNm [30] expresada en células madre embrionarias y células de carcinoma embrionario asociadas con la diferenciación y la proliferación. Thomson et al. demostraron que LIN28 es un factor en la generación de iPSC en combinación con OCT4, SOX2 y NANOG. [18]
  • Glis1 : Glis1 es un factor de transcripción que se puede utilizar con Oct-3/4, Sox2 y Klf4 para inducir la pluripotencia. Presenta numerosas ventajas cuando se utiliza en lugar de C-myc. [31]

Desafíos en la reprogramación de células hacia la pluripotencia

Aunque los métodos desarrollados por Yamanaka y otros han demostrado que las células adultas pueden reprogramarse para convertirse en células iPS, esta tecnología aún presenta desafíos:

  1. Baja eficiencia: en general, la conversión a células iPS ha sido increíblemente baja. Por ejemplo, la tasa a la que las células somáticas se reprogramaron en células iPS en el estudio original de Yamanaka en ratones fue de 0,01-0,1%. [1] La baja tasa de eficiencia puede reflejar la necesidad de una sincronización precisa, equilibrio y niveles absolutos de expresión de los genes de reprogramación. También puede sugerir la necesidad de cambios genéticos o epigenéticos raros en la población de células somáticas original o en el cultivo prolongado. Sin embargo, recientemente se encontró un camino para la reprogramación eficiente que requería la regulación negativa del complejo de remodelación y desacetilación de nucleosomas ( NuRD ). La sobreexpresión de Mbd3, una subunidad de NuRD, inhibe la inducción de iPSC. El agotamiento de Mbd3, por otro lado, mejora la eficiencia de la reprogramación, [32] que da como resultado una reprogramación de células iPS determinista y sincronizada (casi 100% de eficiencia en siete días a partir de células de ratón y humanas). [33]
  2. Inserción genómica: la integración genómica de los factores de transcripción limita la utilidad del enfoque de los factores de transcripción debido al riesgo de que se inserten mutaciones en el genoma de la célula diana. [34] Una estrategia común para evitar la inserción genómica ha sido utilizar un vector diferente para la entrada. Se han explorado plásmidos , adenovirus y vectores de transposones , pero estos suelen tener como contrapartida un menor rendimiento. [35] [36] [37]
  3. Tumorigenicidad: Dependiendo de los métodos utilizados, la reprogramación de células adultas para obtener iPSC puede plantear riesgos significativos que podrían limitar su uso en humanos. Por ejemplo, si se utilizan virus para alterar genómicamente las células, potencialmente se puede desencadenar la expresión de oncogenes (genes que causan cáncer). En febrero de 2008, los científicos anunciaron el descubrimiento de una técnica que podría eliminar oncogenes después de la inducción de pluripotencia, aumentando así el uso potencial de células iPS en enfermedades humanas. [38] En otro estudio, Yamanaka informó que se pueden crear iPSC sin el oncogén c-Myc. El proceso tomó más tiempo y no fue tan eficiente, pero las quimeras resultantes no desarrollaron cáncer. [39] La inactivación o eliminación del supresor tumoral p53, que es un regulador clave del cáncer, aumenta significativamente la eficiencia de la reprogramación. [40] Por lo tanto, parece haber una compensación entre la eficiencia de la reprogramación y la generación de tumores.
  4. Reprogramación incompleta: la reprogramación también se enfrenta al desafío de la completitud. Esto es particularmente difícil porque el código epigenético de todo el genoma debe reformatearse al del tipo de célula objetivo para poder reprogramar completamente una célula. Sin embargo, tres grupos separados lograron encontrar células iPS derivadas de fibroblastos embrionarios de ratón (MEF) que podían inyectarse en blastocistos tetraploides y dieron como resultado el nacimiento vivo de ratones derivados completamente de células iPS, poniendo así fin al debate sobre la equivalencia de las células madre embrionarias (ESC) y las iPS con respecto a la pluripotencia. [41]

La tabla de la derecha resume las estrategias y técnicas clave utilizadas para desarrollar células iPS en los primeros cinco años después del gran avance de Yamanaka et al. en 2006. Las filas de colores similares representan estudios que utilizaron estrategias similares para la reprogramación.

Esta cronología resume las estrategias y técnicas clave utilizadas para desarrollar células iPS en los primeros cinco años posteriores al gran avance de Yamanaka et al. en 2006. Las filas de colores similares representan estudios que utilizaron estrategias similares para la reprogramación.

Enfoques alternativos

Imitación de factores de transcripción con productos químicos

Una de las principales estrategias para evitar los problemas (1) y (2) ha sido utilizar pequeñas moléculas que puedan imitar los efectos de los factores de transcripción. Estos compuestos pueden compensar un factor de reprogramación que no se dirige eficazmente al genoma o falla en la reprogramación por otra razón; por lo tanto, aumentan la eficiencia de la reprogramación. También evitan el problema de la integración genómica, que en algunos casos contribuye a la génesis del tumor. Estudios clave que utilizan dicha estrategia se llevaron a cabo en 2008. Melton et al. estudiaron los efectos del inhibidor de la histona desacetilasa (HDAC), el ácido valproico. Encontraron que aumentaba la eficiencia de la reprogramación 100 veces (en comparación con el método tradicional de factor de transcripción de Yamanaka). [42] Los investigadores propusieron que este compuesto imitaba la señalización que generalmente es causada por el factor de transcripción c-Myc. Se propuso un tipo similar de mecanismo de compensación para imitar los efectos de Sox2 . En 2008, Ding et al. En julio de 2013, Deng et al., de la Universidad de Pekín , utilizaron la inhibición de la metiltransferasa de histonas (HMT) con BIX-01294 en combinación con la activación de los canales de calcio en la membrana plasmática para aumentar la eficiencia de la reprogramación. [43] Deng et al., de la Universidad de Pekín, informaron que se pueden crear células madre pluripotentes inducidas sin ninguna modificación genética. Utilizaron un cóctel de siete compuestos de moléculas pequeñas, incluido DZNep, para inducir las células somáticas de ratón en células madre a las que llamaron células CiPS con una eficiencia (del 0,2 %) comparable a las que utilizan técnicas de producción de iPSC estándar. Las células CiPS se introdujeron en embriones de ratón en desarrollo y se descubrió que contribuían a todos los tipos principales de células, lo que demuestra su pluripotencia. [44] [45]

Ding et al . demostraron una alternativa a la reprogramación de factores de transcripción mediante el uso de sustancias químicas similares a fármacos. Al estudiar el proceso de transición mesenquimal-epitelial (MET) en el que los fibroblastos son empujados a un estado similar al de las células madre, el grupo de Ding identificó dos sustancias químicas (el inhibidor de ALK5 SB431412 y el inhibidor de MEK (proteína quinasa activada por mitógeno) PD0325901) que se descubrió que aumentaban la eficiencia del método genético clásico en 100 veces. Al agregar un tercer compuesto conocido por estar involucrado en la vía de supervivencia celular, la tiazovivina aumenta aún más la eficiencia en 200 veces. El uso de la combinación de estos tres compuestos también redujo el proceso de reprogramación de los fibroblastos humanos de cuatro semanas a dos semanas. [46] [47]

En abril de 2009, se demostró que la generación de células iPS es posible sin ninguna alteración genética de la célula adulta: un tratamiento repetido de las células con ciertas proteínas canalizadas hacia las células a través de anclajes de poliarginina fue suficiente para inducir la pluripotencia. [48] El acrónimo dado para esas iPSC es piPSCs (células madre pluripotentes inducidas por proteínas).

Vectores alternativos

Otra estrategia clave para evitar problemas como la tumorogénesis y el bajo rendimiento ha sido utilizar formas alternativas de vectores: adenovirus , plásmidos y compuestos proteicos o de ADN desnudo.

En 2008, Hochedlinger et al. utilizaron un adenovirus para transportar los cuatro factores de transcripción necesarios al ADN de las células de la piel y el hígado de ratones, lo que dio como resultado células idénticas a las células madre embrionarias. El adenovirus es único en comparación con otros vectores, como los virus y los retrovirus, porque no incorpora ninguno de sus propios genes en el huésped objetivo y evita la posibilidad de mutagénesis por inserción. [43] En 2009, Freed et al. demostraron una reprogramación exitosa de fibroblastos humanos a células iPS. [49] Otra ventaja de usar adenovirus es que solo necesitan estar presentes durante un breve período de tiempo para que se produzca una reprogramación efectiva.

También en 2008, Yamanaka et al. descubrieron que podían transferir los cuatro genes necesarios con un plásmido. [35] El grupo de Yamanaka reprogramó con éxito células de ratón mediante la transfección con dos construcciones de plásmidos que portaban los factores de reprogramación; el primer plásmido expresaba c-Myc, mientras que el segundo expresaba los otros tres factores ( Oct4 , Klf4 y Sox2 ). Aunque los métodos de plásmidos evitan los virus, aún requieren genes promotores del cáncer para lograr la reprogramación. El otro problema principal con estos métodos es que tienden a ser mucho menos eficientes en comparación con los métodos retrovirales. Además, se ha demostrado que los plásmidos transfectados se integran en el genoma del huésped y, por lo tanto, aún plantean el riesgo de mutagénesis insercional. Debido a que los enfoques no retrovirales han demostrado niveles de eficiencia tan bajos, los investigadores han intentado rescatar eficazmente la técnica con lo que se conoce como el Sistema de transposón PiggyBac . Varios estudios han demostrado que este sistema puede entregar eficazmente los factores de reprogramación clave sin dejar mutaciones de huella en el genoma de la célula huésped. El sistema de transposón PiggyBac implica la reexcisión de genes exógenos, lo que elimina el problema de la mutagénesis insercional. [ cita requerida ]

Adquisición de células pluripotenciales desencadenada por estímulos

En enero de 2014, se publicaron dos artículos que afirmaban que se puede generar un tipo de célula madre pluripotente sometiendo las células a ciertos tipos de estrés (toxina bacteriana, un pH bajo de 5,7 o compresión física); las células resultantes se denominaron células STAP, por adquisición de pluripotencia desencadenada por estímulo . [50]

En vista de las dificultades que otros laboratorios tuvieron para replicar los resultados del sorprendente estudio, en marzo de 2014, uno de los coautores solicitó que se retractaran los artículos. [51] El 4 de junio de 2014, la autora principal, Obokata , aceptó retractarse de ambos artículos [52] después de que se descubriera que había cometido "mala conducta en la investigación", como se concluyó en una investigación de RIKEN el 1 de abril de 2014. [53]

Moléculas de ARN

Los microARN son moléculas cortas de ARN que se unen a secuencias complementarias en el ARN mensajero y bloquean la expresión de un gen. La medición de las variaciones en la expresión de microARN en células iPS se puede utilizar para predecir su potencial de diferenciación. [54] La adición de microARN también se puede utilizar para mejorar el potencial de las iPS. Se han propuesto varios mecanismos. [54] Las moléculas de microARN específicas de células madre embrionarias (como miR-291, miR-294 y miR-295) mejoran la eficiencia de la pluripotencia inducida al actuar aguas abajo de c-Myc. [55] Los microARN también pueden bloquear la expresión de represores de los cuatro factores de transcripción de Yamanaka, y puede haber mecanismos adicionales que induzcan la reprogramación incluso en ausencia de factores de transcripción exógenos añadidos. [54]

Identidad

Tres células/tejidos de la línea germinal diferenciados a partir de iPSC: neuronas ( ectodermo ), cartílago (hueso blando, mesodermo ) y células caliciformes en el intestino ( endodermo ).

Las células madre pluripotentes inducidas son similares a las células madre pluripotentes naturales, como las células madre embrionarias, en muchos aspectos, como la expresión de ciertos genes y proteínas de células madre, los patrones de metilación de la cromatina , el tiempo de duplicación, la formación del cuerpo embrionario , la formación de teratomas , la formación de quimeras viables y la potencia y diferenciabilidad, pero aún se está evaluando el alcance total de su relación con las células madre pluripotentes naturales. [1]

Se encontró que la expresión génica y las H3K4me3 y H3K27me3 a nivel de genoma eran extremadamente similares entre las células ES y las iPS. [56] [ cita requerida ] Las iPSC generadas fueron notablemente similares a las células madre pluripotentes aisladas naturalmente (como las células madre embrionarias de ratón y humanas, mESC y hESC, respectivamente) en los siguientes aspectos, lo que confirma la identidad, autenticidad y pluripotencia de las iPSC con respecto a las células madre pluripotentes aisladas naturalmente:

  • Propiedades biológicas celulares
    • Morfología: las iPSC eran morfológicamente similares a las células madre embrionarias. Cada célula tenía forma redonda, un nucléolo grande y un citoplasma escaso . Las colonias de iPSC también eran similares a las de las células madre embrionarias. Las iPSC humanas formaban colonias de bordes afilados, planas y muy compactas similares a las hESC, y las iPSC de ratón formaban colonias similares a las mESC, menos planas y más agregadas que las de las hESC.
    • Propiedades de crecimiento: El tiempo de duplicación y la actividad mitótica son piedras angulares de las ESC, ya que las células madre deben autorenovarse como parte de su definición. Las iPSC eran mitóticamente activas, se autorenovaban activamente, proliferaban y se dividían a un ritmo igual al de las ESC.
    • Marcadores de células madre: las iPSC expresaron marcadores antigénicos de superficie celular expresados ​​en células madre embrionarias. Las iPSC humanas expresaron los marcadores específicos de las células madre embrionarias humanas, incluidos SSEA-3, SSEA-4, TRA-1-60, TRA-1-81, TRA-2-49/6E y Nanog. Las iPSC de ratón expresaron SSEA-1 pero no SSEA-3 ni SSEA-4, de manera similar a las células madre embrionarias humanas.
    • Genes de células madre: las iPSC expresaron genes expresados ​​en células madre embrionarias no diferenciadas, incluidos Oct-3/4, Sox2, Nanog, GDF3, REX1, FGF4, ESG1, DPPA2, DPPA4 y hTERT.
    • Actividad de la telomerasa: Las telomerasas son necesarias para mantener la división celular sin restricciones por el límite de Hayflick de ~50 divisiones celulares. Las hESC expresan una alta actividad de telomerasa para mantener la autorrenovación y la proliferación, y las iPSC humanas también demuestran una alta actividad de telomerasa y expresan hTERT ( transcriptasa inversa de la telomerasa humana ), un componente necesario en el complejo proteico de la telomerasa.
  • Pluripotencia: las iPSC fueron capaces de diferenciarse de manera similar a las ESC en tejidos completamente diferenciados.
    • Diferenciación neuronal: las iPSC se diferenciaron en neuronas , expresando βIII-tubulina, tirosina hidroxilasa, AADC, DAT, ChAT, LMX1B y MAP2. La presencia de enzimas asociadas a catecolaminas puede indicar que las iPSC, al igual que las hESC, pueden diferenciarse en neuronas dopaminérgicas . Los genes asociados a células madre se regularon a la baja después de la diferenciación.
    • Diferenciación cardíaca: las células madre pluripotentes inducidas (iPSC) se diferenciaron en cardiomiocitos que comenzaron a latir espontáneamente. Los cardiomiocitos expresaron TnTc, MEF2C, MYL2A, MYHCβ y NKX2.5. Los genes asociados a las células madre se redujeron después de la diferenciación.
    • Formación de teratomas: las células iPSC inyectadas en ratones inmunodeficientes formaron espontáneamente teratomas después de nueve semanas. Los teratomas son tumores de múltiples linajes que contienen tejido derivado de las tres capas germinales : endodermo , mesodermo y ectodermo ; a diferencia de otros tumores, que normalmente son de un solo tipo de célula. La formación de teratomas es una prueba de referencia para la pluripotencia.
    • Cuerpo embrionario: las hESC en cultivo forman espontáneamente estructuras similares a embriones con forma de bola denominadas " cuerpos embrionarios ", que consisten en un núcleo de hESC mitóticamente activas y diferenciadoras y una periferia de células completamente diferenciadas de las tres capas germinales. Las iPSC también forman cuerpos embrionarios y tienen células periféricas diferenciadas.
    • Ratones quiméricos: las hESC residen naturalmente dentro de la masa celular interna ( embrioblasto ) de los blastocistos , y en el embrioblasto, se diferencian en el embrión mientras que la cubierta del blastocisto ( trofoblasto ) se diferencia en tejidos extraembrionarios. El trofoblasto hueco es incapaz de formar un embrión vivo y, por lo tanto, es necesario que las células madre embrionarias dentro del embrioblasto se diferencien y formen el embrión. Las iPSC se inyectaron mediante micropipeta en un trofoblasto y el blastocisto se transfirió a hembras receptoras. Se crearon crías de ratón vivas quiméricas : ratones con derivados de iPSC incorporados en todo su cuerpo con un 10-90% de quimerismo.
    • Complementación tetraploide : las células iPS de fibroblastos fetales de ratón inyectadas en blastocistos tetraploides (que solo pueden formar tejidos extraembrionarios) pueden formar ratones fértiles, no quiméricos y completos, aunque con una baja tasa de éxito. [41] [57] [58] La eficiencia de la producción de ratones totalmente PSC podría aumentarse mediante una exposición breve de la línea de células madre pluripotentes a un plásmido episomal que codifica para Sox2 y Klf4 modificados genéticamente (cóctel SK). [29]
  • Reprogramación epigenética
    • Desmetilación del promotor: la metilación es la transferencia de un grupo metilo a una base de ADN, típicamente la transferencia de un grupo metilo a una molécula de citosina en un sitio CpG (secuencia citosina/guanina adyacente). La metilación generalizada de un gen interfiere con la expresión al impedir la actividad de las proteínas de expresión o al reclutar enzimas que interfieren con la expresión. Por lo tanto, la metilación de un gen lo silencia de manera efectiva al impedir la transcripción. Los promotores de genes asociados a la pluripotencia, incluidos Oct-3/4, Rex1 y Nanog, se desmetilaron en iPSC, lo que demuestra su actividad promotora y la promoción y expresión activa de genes asociados a la pluripotencia en iPSC.
    • Metilación del ADN a nivel global: las células iPS humanas son muy similares a las células ES en sus patrones de metilación de citosinas , más que a cualquier otro tipo de célula. Sin embargo, alrededor de mil sitios muestran diferencias en varias líneas de células iPS. La mitad de ellas se asemejan a la línea de células somáticas de las que se derivaron las células iPS, el resto son específicas de las iPSC. También se han encontrado decenas de regiones de tamaño de megabases en las que las células iPS no se reprograman al estado de célula ES. [59]
    • Desmetilación de histonas: las histonas son proteínas compactadoras que se localizan estructuralmente en secuencias de ADN que pueden afectar su actividad a través de diversas modificaciones relacionadas con la cromatina. Las histonas H3 asociadas con Oct-3/4, Sox2 y Nanog fueron desmetiladas, lo que indica la expresión de Oct-3/4, Sox2 y Nanog.

Seguridad

  • La principal preocupación con respecto a la posible aplicación clínica de las iPSC es su propensión a formar tumores. [60] De manera muy similar a las células madre embrionarias, las iPSC forman fácilmente teratomas cuando se inyectan en ratones inmunodeficientes. La FDA considera que la formación de teratomas es un obstáculo importante para la medicina regenerativa basada en células madre.
  • Un estudio más reciente sobre la recuperación funcional motora después de lesiones de la médula espinal en ratones mostró que después de que se trasplantaran células madre pluripotentes inducidas por humanos a los ratones, las células se diferenciaron en tres linajes neuronales en la médula espinal. Las células estimularon el recrecimiento de la médula espinal dañada, mantuvieron la mielinización y formaron sinapsis. Estos resultados positivos se observaron durante más de 112 días después de la lesión de la médula espinal, sin formación de tumores. [61] Sin embargo, un estudio de seguimiento realizado por el mismo grupo mostró que clones distintos de células madre pluripotentes inducidas por humanos finalmente formaron tumores. [62]
  • Dado que, por el momento, las iPSC solo se pueden producir con alta eficiencia mediante modificaciones, se prevé que sean menos seguras y más tumorígenas que las hESC. Todos los genes que se ha demostrado que promueven la formación de iPSC también se han relacionado con el cáncer de una forma u otra. Algunos de los genes son oncogenes conocidos, incluidos los miembros de la familia Myc. Si bien la omisión de Myc aún permite la formación de iPSC, la eficiencia se reduce hasta 100 veces.
  • Se ha demostrado un método no genético para producir iPSC utilizando proteínas recombinantes, pero su eficiencia fue bastante baja. [48] Sin embargo, los refinamientos de esta metodología que produzcan una mayor eficiencia pueden llevar a la producción de iPSC más seguras. En general, se cree que otros enfoques, como el uso de adenovirus o plásmidos, son más seguros que los métodos retrovirales.
  • Un área importante para futuros estudios en el campo de las iPSC es la prueba directa de la tumorigenicidad de las iPSC utilizando métodos que imitan los enfoques que se utilizarían para las terapias de medicina regenerativa. Estos estudios son cruciales ya que las iPSC no sólo forman teratomas, sino que también los ratones derivados de las iPSC tienen una alta incidencia de muerte por cáncer maligno. [63] En 2010 se publicó un artículo en la revista Stem Cells que indicaba que las células iPS son mucho más tumorígenas que las células madre embrionarias, lo que respalda la idea de que la seguridad de las células iPS es una preocupación seria. [64]
  • La preocupación con respecto a la inmunogenicidad de las células IPS surgió en 2011 cuando Zhou et al. realizaron un estudio que involucraba un ensayo de formación de teratomas y demostraron que las células IPS producían una respuesta inmunológica lo suficientemente fuerte como para causar el rechazo de las células. Sin embargo, cuando se realizó un procedimiento similar en células ES genéticamente equivalentes, Zhou et al. encontraron teratomas , lo que indicó que las células fueron toleradas por el sistema inmunológico. [65] En 2013, Araki et al. intentaron reproducir la conclusión obtenida por Zhou et al. utilizando un procedimiento diferente. Tomaron células de una quimera que se había cultivado a partir de clones de IPSC y un embrión de ratón, luego este tejido se trasplantó en ratones singénicos . Realizaron un ensayo similar utilizando células ES en lugar de clones de IPSC y compararon los resultados. Los hallazgos indican que no hubo una diferencia significativa en la respuesta inmunogénica producida por las células IPS y las células ES. Además, Araki et al. informaron poca o ninguna respuesta inmunogénica para ambas líneas celulares. [66] Por lo tanto, Araki et al. no pudieron llegar a la misma conclusión que Zhou et al.

Investigación médica

La tarea de producir células iPS sigue siendo un desafío debido a los seis problemas mencionados anteriormente. Un compromiso clave que superar es el que existe entre la eficiencia y la integración genómica. La mayoría de los métodos que no dependen de la integración de transgenes son ineficientes, mientras que los que sí dependen de la integración de transgenes enfrentan los problemas de la reprogramación incompleta y la génesis tumoral, aunque se ha intentado una gran cantidad de técnicas y métodos. Otro gran conjunto de estrategias es realizar una caracterización proteómica de las células iPS. [58] Estudios adicionales y nuevas estrategias deberían generar soluciones óptimas para los cinco desafíos principales. Un enfoque podría intentar combinar los atributos positivos de estas estrategias en una técnica en última instancia efectiva para reprogramar células a células iPS.

Otro enfoque es el uso de células iPS derivadas de pacientes para identificar fármacos terapéuticos capaces de rescatar un fenotipo. Por ejemplo, las líneas de células iPS derivadas de pacientes afectados por el síndrome de displasia ectodérmica (EEC), en el que el gen p63 está mutado, muestran un compromiso epitelial anormal que podría ser rescatado parcialmente por un compuesto pequeño. [67]

Modelado de enfermedades y desarrollo de fármacos

Una característica atractiva de las células iPS humanas es la capacidad de obtenerlas de pacientes adultos para estudiar la base celular de las enfermedades humanas. Dado que las células iPS se autorrenuevan y son pluripotentes, representan una fuente teóricamente ilimitada de células derivadas de pacientes que pueden convertirse en cualquier tipo de célula del cuerpo. Esto es particularmente importante porque muchos otros tipos de células humanas derivadas de pacientes tienden a dejar de crecer después de unos pocos pases en un cultivo de laboratorio. Se han generado células iPS para una amplia variedad de enfermedades genéticas humanas, incluidos trastornos comunes como el síndrome de Down y la enfermedad renal poliquística. [68] [69] [70] En muchos casos, las células iPS derivadas de pacientes presentan defectos celulares que no se observan en las células iPS de sujetos sanos, lo que proporciona información sobre la fisiopatología de la enfermedad. [71] [72] En 2012 se formó un proyecto de colaboración internacional, StemBANCC, para crear una colección de líneas de células iPS para la detección de fármacos para una variedad de enfermedades. Gestionado por la Universidad de Oxford , el esfuerzo reunió fondos y recursos de 10 compañías farmacéuticas y 23 universidades. El objetivo es generar una biblioteca de 1.500 líneas de células iPS que se utilizarán en pruebas tempranas de fármacos proporcionando un entorno de enfermedad humana simulado. [73] Además, la combinación de la tecnología de hiPSC y los indicadores de voltaje y calcio de moléculas pequeñas o codificados genéticamente proporcionó una plataforma a gran escala y de alto rendimiento para la detección de la seguridad de los fármacos cardiovasculares. [74] [75] [76] [77] [78]

Síntesis de órganos

Un equipo de investigadores japoneses ha publicado un estudio de prueba de concepto sobre el uso de células madre pluripotentes inducidas (iPSC) para generar órganos humanos para trasplantes . Se han cultivado "brotes hepáticos " humanos (iPSC-LB) a partir de una mezcla de tres tipos diferentes de células madre: hepatocitos (para la función hepática) obtenidos a partir de iPSC; células madre endoteliales (para formar el revestimiento de los vasos sanguíneos ) a partir de la sangre del cordón umbilical ; y células madre mesenquimales (para formar tejido conectivo ). Este nuevo enfoque permite que distintos tipos de células se autoorganicen en un órgano complejo, imitando el proceso del desarrollo fetal . Tras crecer in vitro durante unos días, los brotes hepáticos se trasplantaron a ratones, donde el "hígado" se conectó rápidamente con los vasos sanguíneos del huésped y siguió creciendo. Lo más importante es que realizó funciones hepáticas habituales, como metabolizar fármacos y producir proteínas específicas del hígado. Estudios posteriores controlarán la longevidad del órgano trasplantado en el organismo del huésped (capacidad de integrarse o evitar el rechazo ) y si se transformará en tumores . [79] [80]

Regeneración de órganos

En 2021, se demostró en ratones un enfoque basado en la reprogramación de factores Yamanaka conmutables para la regeneración del corazón dañado sin formación de tumores, y tuvo éxito si la intervención se llevó a cabo inmediatamente antes o después de un ataque cardíaco. [81]

Reparación de tejidos

Las células de sangre del cordón umbilical embrionarias se indujeron a convertirse en células madre pluripotentes utilizando ADN plasmídico. Utilizando los marcadores endoteliales/pericíticos de la superficie celular CD31 y CD146 , los investigadores identificaron el "progenitor vascular", las células madre vasculares multipotentes de alta calidad. Después de que las células iPS se inyectaran directamente en el vítreo de la retina dañada de ratones, las células madre se injertaron en la retina, crecieron y repararon los vasos vasculares . [82] [83]

Se demostró que las células madre neurales derivadas de iPSC marcadas inyectadas en animales de laboratorio con lesiones cerebrales migraron a las lesiones y se observó cierta mejora en la función motora. [84]

Cardiomiocitos

Las células musculares cardíacas palpitantes, cardiomiocitos derivados de iPSC , se pueden producir en masa utilizando protocolos de diferenciación definidos químicamente. [85] [86] Estos protocolos normalmente modulan las mismas vías de señalización del desarrollo requeridas para el desarrollo del corazón . [87] Estos cardiomiocitos de iPSC pueden recapitular arritmias genéticas y respuestas a fármacos cardíacos, ya que exhiben el mismo trasfondo genético que el paciente del que se derivaron. [88] [89] [90] [91]

En junio de 2014, Takara Bio recibió una transferencia de tecnología de iHeart Japan, una empresa de capital de riesgo del Instituto de Investigación de Células iPS de la Universidad de Kioto, para hacer posible el uso exclusivo de tecnologías y patentes que inducen la diferenciación de células iPS en cardiomiocitos en Asia. La empresa anunció la idea de vender cardiomiocitos a empresas farmacéuticas y universidades para ayudar a desarrollar nuevos medicamentos para enfermedades cardíacas. [92]

El 9 de marzo de 2018, el Comité de Medicina Regenerativa Específica de la Universidad de Osaka aprobó oficialmente el primer plan de investigación clínica del mundo para trasplantar una "lámina miocárdica" hecha de células iPS al corazón de pacientes con insuficiencia cardíaca grave. La Universidad de Osaka anunció que había presentado una solicitud ante el Ministerio de Salud, Trabajo y Bienestar Social el mismo día.

El 16 de mayo de 2018, el plan de investigación clínica fue aprobado por el grupo de expertos del Ministerio de Salud, Trabajo y Bienestar Social con una condición. [93] [94]

En octubre de 2019, un grupo de la Universidad de Okayama desarrolló un modelo de cardiopatía isquémica utilizando cardiomiocitos diferenciados de células iPS. [95]

Glóbulos rojos

Aunque una pinta de sangre donada contiene alrededor de dos billones de glóbulos rojos y se recolectan más de 107 millones de donaciones de sangre en todo el mundo, todavía existe una necesidad crítica de sangre para transfusiones. En 2014, se sintetizaron glóbulos rojos tipo O en el Servicio Nacional de Transfusión de Sangre de Escocia a partir de células madre pluripotentes inducidas (iPSC). Se indujo a las células a convertirse en mesodermo y luego en glóbulos rojos y luego en glóbulos sanguíneos. El paso final fue hacer que expulsaran sus núcleos y maduraran adecuadamente. El tipo O puede transfundirse a todos los pacientes. No se esperaba que los ensayos clínicos en humanos comenzaran antes de 2016. [96]

Ensayo clínico

El primer ensayo clínico en humanos con iPSC autólogas fue aprobado por el Ministerio de Salud de Japón y se iba a realizar en 2014 en el Centro Riken de Biología del Desarrollo en Kobe . Sin embargo, el ensayo se suspendió después de que las nuevas leyes de medicina regenerativa de Japón entraran en vigor en noviembre de 2015. [97] Más específicamente, se fortaleció un conjunto existente de pautas para que tuviera fuerza de ley (anteriormente meras recomendaciones). [98] Las iPSC derivadas de células de la piel de seis pacientes con degeneración macular húmeda relacionada con la edad se reprogramaron para diferenciarse en células del epitelio pigmentario de la retina (EPR). La capa de células se trasplantaría a la retina afectada donde se extirpó el tejido EPR degenerado. El monitoreo de seguridad y restauración de la visión debía durar de uno a tres años. [99] [100]

En marzo de 2017, un equipo dirigido por Masayo Takahashi completó el primer trasplante exitoso de células de retina derivadas de iPS de un donante en el ojo de una persona con degeneración macular avanzada. [101] Sin embargo, se informó que ahora están teniendo complicaciones. [102] Los beneficios de usar iPSC autólogas son que teóricamente no hay riesgo de rechazo y que elimina la necesidad de usar células madre embrionarias. Sin embargo, estas iPSC se derivaron de otra persona. [100]

Actualmente se están llevando a cabo nuevos ensayos clínicos con células madre pluripotentes in vitro no solo en Japón, sino también en Estados Unidos y Europa. [103] Una investigación realizada en 2021 en el registro de ensayos Clinicaltrials.gov identificó 129 listados de ensayos que mencionaban células madre pluripotentes in vitro, pero la mayoría no eran intervencionistas. [104]

Estrategia para la obtención de células madre pluripotentes universales

Para que las tecnologías de medicina regenerativa basadas en iPSC estén disponibles para más pacientes, es necesario crear iPSC universales que puedan trasplantarse independientemente de los haplotipos de HLA . La estrategia actual para la creación de iPSC universales tiene dos objetivos principales: eliminar la expresión de HLA y prevenir los ataques de las células NK debido a la eliminación de HLA. Se ha informado que la eliminación de los genes B2M y CIITA utilizando el sistema CRISPR/Cas9 suprime la expresión de HLA de clase I y clase II, respectivamente. Para evitar los ataques de las células NK, se ha utilizado la transducción de ligandos que inhiben las células NK, como HLA-E y CD47 . [105] HLA-C se deja sin cambios, ya que los 12 alelos comunes de HLA-C son suficientes para cubrir el 95% de la población mundial. [105]

Propiedades antienvejecimiento

Una célula madre mesenquimal multipotente, cuando se la induce a la pluripotencia, es muy prometedora para frenar o revertir los fenotipos del envejecimiento. Estas propiedades antienvejecimiento se demostraron en los primeros ensayos clínicos en 2017. [106] En 2020, los investigadores de la Universidad de Stanford concluyeron, después de estudiar ratones ancianos, que las células humanas viejas, cuando se las somete a los factores de Yamanaka, podrían rejuvenecer y volverse casi indistinguibles de sus contrapartes más jóvenes. [107]

Véase también

Referencias

  1. ^ abcd Takahashi K, Yamanaka S (agosto de 2006). "Inducción de células madre pluripotentes a partir de cultivos de fibroblastos embrionarios y adultos de ratón mediante factores definidos". Cell . 126 (4): 663–76. doi : 10.1016/j.cell.2006.07.024 . hdl : 2433/159777 . PMID  16904174.Icono de acceso abierto
  2. ^ "El Premio Nobel de Fisiología o Medicina – Nota de prensa 2012". Nobel Media AB. 8 de octubre de 2012.
  3. ^ Mahla RS (2016). "Aplicaciones de células madre en medicina regenerativa y terapias de enfermedades". Revista internacional de biología celular . 2016 : 6940283. doi : 10.1155/2016/6940283 . PMC 4969512. PMID  27516776 . 
  4. ^ Klimanskaya I, Chung Y, Becker S, Lu SJ, Lanza R (noviembre de 2006). "Líneas de células madre embrionarias humanas derivadas de blastómeros individuales". Nature . 444 (7118): 481–5. Bibcode :2006Natur.444..481K. doi :10.1038/nature05142. PMID  16929302. S2CID  84792371.
  5. ^ Hockemeyer D, Jaenisch R (mayo de 2016). "Las células madre pluripotentes inducidas se encuentran con la edición genómica". Cell Stem Cell . 18 (5): 573–86. doi :10.1016/j.stem.2016.04.013. PMC 4871596 . PMID  27152442. 
  6. ^ "「i」PSなぜ小文字？ 山中さんってどんな人？".朝日新聞. 8 de octubre de 2012. Archivado desde el original el 21 de noviembre de 2012 . Consultado el 27 de abril de 2013 .
  7. ^ "万能なiPS細胞「iPodのように普及してほしい」".スポーツニッポン. 9 de octubre de 2012 . Consultado el 14 de octubre de 2012 .
  8. ^ "山中教授の「iPS細胞」ってiPod のパクリ!?流行らせたいと頭小文字". J-CAST ニ ュ ー ス. 9 de octubre de 2012 . Consultado el 28 de abril de 2013 .
  9. ^ Eguizabal C, Aran B, Chuva de Sousa Lopes SM, Geens M, Heindryckx B, Panula S, Popovic M, Vassena R, Veiga A (2019). "Dos décadas de células madre embrionarias: una reseña histórica". Reproducción Humana Abierto . 2019 (1): hoy024. doi : 10.1093/hropen/hoy024 . PMC 6396646 . PMID  30895264. 
  10. ^ Yamanaka S (diciembre de 2013). "El sinuoso camino hacia la pluripotencia (Conferencia Nobel)". Angewandte Chemie . 52 (52): 13900–9. doi :10.1002/anie.201306721. PMID  24255017.
  11. ^ Guo XL, Chen JS (2015). "Investigación sobre células madre pluripotentes inducidas y su aplicación en tejidos oculares". Revista Internacional de Oftalmología . 8 (4): 818–25. doi :10.3980/j.issn.2222-3959.2015.04.31. PMC 4539634 . PMID  26309885. 
  12. ^ Thornton, Christopher D.; Fielding, Stuart; Karbowniczek, Kinga; Roig-Merino, Alicia; Burrows, Alysha E.; FitzPatrick, Lorna M.; Sharaireh, Aseel; Tite, John P.; Mole, Sara E.; Harbottle, Richard P.; Caproni, Lisa J.; McKay, Tristan R. (10 de diciembre de 2021). "Generación segura y estable de células madre pluripotentes inducidas utilizando vectores de ADN doggybone". Terapia molecular: métodos y desarrollo clínico . 23 : 348–358. doi :10.1016/j.omtm.2021.09.018. ISSN  2329-0501. PMC 8546411 . PMID  34729381. 
  13. ^ Okita K, Ichisaka T, Yamanaka S (julio de 2007). "Generación de células madre pluripotentes inducidas con capacidad germinal". Nature . 448 (7151): 313–7. Bibcode :2007Natur.448..313O. doi :10.1038/nature05934. PMID  17554338. S2CID  459050.
  14. ^ Wernig M, Meissner A, Foreman R, Brambrink T, Ku M, Hochedlinger K, et al. (julio de 2007). "Reprogramación in vitro de fibroblastos en un estado similar al de las células madre embrionarias pluripotentes". Nature . 448 (7151): 318–24. Bibcode :2007Natur.448..318W. doi :10.1038/nature05944. PMID  17554336. S2CID  4377572.
  15. ^ Maherali N, Sridharan R, Xie W, Utikal J, Eminli S, Arnold K, et al. (junio de 2007). "Los fibroblastos directamente reprogramados muestran una remodelación epigenética global y una contribución tisular generalizada". Cell Stem Cell . 1 (1): 55–70. doi : 10.1016/j.stem.2007.05.014 . PMID  18371336.
  16. ^ "Generaciones de células madre pluripotentes inducidas y referencias relacionadas". Archivado desde el original el 30 de junio de 2018. Consultado el 5 de noviembre de 2007 .
  17. ^ Takahashi K, Tanabe K, Ohnuki M, Narita M, Ichisaka T, Tomoda K, Yamanaka S (noviembre de 2007). "Inducción de células madre pluripotentes a partir de fibroblastos humanos adultos mediante factores definidos". Cell . 131 (5): 861–72. doi : 10.1016/j.cell.2007.11.019 . hdl : 2433/49782 . PMID  18035408.
  18. ^ ab Yu J, Vodyanik MA, Smuga-Otto K, Antosiewicz-Bourget J, Frane JL, Tian S, et al. (diciembre de 2007). "Líneas de células madre pluripotentes inducidas derivadas de células somáticas humanas". Science . 318 (5858): 1917–20. Bibcode :2007Sci...318.1917Y. doi :10.1126/science.1151526. PMID  18029452. S2CID  86129154.
  19. ^ abc Yamanaka S (julio de 2010). "Las células madre pluripotentes específicas para cada paciente se vuelven aún más accesibles". Cell Stem Cell . 7 (1): 1–2. doi : 10.1016/j.stem.2010.06.009 . PMID  20621038.
  20. ^ ab Maherali N, Hochedlinger K (diciembre de 2008). "Directrices y técnicas para la generación de células madre pluripotentes inducidas". Cell Stem Cell . 3 (6): 595–605. doi : 10.1016/j.stem.2008.11.008 . PMID  19041776.
  21. ^ Maherali N, Ahfeldt T, Rigamonti A, Utikal J, Cowan C, Hochedlinger K (septiembre de 2008). "Un sistema de alta eficiencia para la generación y el estudio de células madre pluripotentes inducidas humanas". Cell Stem Cell . 3 (3): 340–5. doi :10.1016/j.stem.2008.08.003. PMC 3987901 . PMID  18786420. 
  22. ^ Aasen T, Raya A, Barrero MJ, Garreta E, Consiglio A, Gonzalez F, et al. (noviembre de 2008). "Generación eficiente y rápida de células madre pluripotentes inducidas a partir de queratinocitos humanos". Nature Biotechnology . 26 (11): 1276–84. doi :10.1038/nbt.1503. PMID  18931654. S2CID  205274019.
  23. ^ Staerk J, Dawlaty MM, Gao Q, Maetzel D, Hanna J, Sommer CA, et al. (julio de 2010). "Reprogramación de células sanguíneas periféricas humanas a células madre pluripotentes inducidas". Cell Stem Cell . 7 (1): 20–4. doi :10.1016/j.stem.2010.06.002. PMC 2917234 . PMID  20621045. 
  24. ^ Loh YH, Hartung O, Li H, Guo C, Sahalie JM, Manos PD, et al. (julio de 2010). "Reprogramación de células T de sangre periférica humana". Cell Stem Cell . 7 (1): 15–9. doi :10.1016/j.stem.2010.06.004. PMC 2913590 . PMID  20621044. 
  25. ^ Zhou T, Benda C, Dunzinger S, Huang Y, Ho JC, Yang J, et al. (diciembre de 2012). "Generación de células madre pluripotentes humanas inducidas a partir de muestras de orina". Nature Protocols . 7 (12): 2080–9. doi :10.1038/nprot.2012.115. PMID  23138349. S2CID  205465442.
  26. ^ Polo JM, Liu S, Figueroa ME, Kulalert W, Eminli S, Tan KY, et al. (agosto de 2010). "El tipo de origen celular influye en las propiedades moleculares y funcionales de las células madre pluripotentes inducidas en ratones". Nature Biotechnology . 28 (8): 848–55. doi :10.1038/nbt.1667. PMC 3148605 . PMID  20644536. 
  27. ^ Velychko S, Adachi K, Kim KP, Hou Y, MacCarthy CM, Wu G, Schöler HR (diciembre de 2019). "Excluir Oct4 del cóctel Yamanaka libera el potencial de desarrollo de las iPSC". Cell Stem Cell . 25 (6): 737–753.e4. doi :10.1016/j.stem.2019.10.002. PMC 6900749 . PMID  31708402. 
  28. ^ La calidad de las células madre pluripotentes inducidas se mejora drásticamente al omitir lo que se pensaba que era el factor de reprogramación más crucial Oct4 no solo es innecesario sino también perjudicial durante la generación de células madre pluripotentes inducidas (iPSC) de ratón.
  29. ^ abc MacCarthy, Caitlin M.; Wu, Guangming; Malik, Vikas; Menuchin-Lasowski, Yotam; Velychko, Taras; Keshet, Gal; Fan, Rui; Bedzhov, Iván; Iglesia, George M.; Jauch, Ralf; Cojocaru, Vlad; Schöler, Hans R.; Velychko, Sergiy (diciembre de 2023). "El super-SOX quimérico altamente cooperativo induce una pluripotencia ingenua entre especies". Célula madre celular . 31 (1): 127–147.e9. doi : 10.1016/j.stem.2023.11.010 . PMID  38141611.
  30. ^ Ali PS, Ghoshdastider U, Hoffmann J, Brutschy B, Filipek S (noviembre de 2012). "Reconocimiento del precursor de miRNA let-7g por Lin28B humano". FEBS Letters . 586 (22): 3986–90. Bibcode :2012FEBSL.586.3986S. doi : 10.1016/j.febslet.2012.09.034 . PMID  23063642. S2CID  28899778.
  31. ^ Maekawa M, Yamaguchi K, Nakamura T, Shibukawa R, Kodanaka I, Ichisaka T, et al. (junio de 2011). "La reprogramación directa de células somáticas es promovida por el factor de transcripción materno Glis1". Nature . 474 (7350): 225–9. doi :10.1038/nature10106. hdl : 2433/141930 . PMID  21654807. S2CID  4428172.
  32. ^ Luo M, Ling T, Xie W, Sun H, Zhou Y, Zhu Q, et al. (julio de 2013). "NuRD bloquea la reprogramación de células somáticas de ratón en células madre pluripotentes". Células madre . 31 (7): 1278–86. doi :10.1002/stem.1374. hdl : 10397/18487 . PMID  23533168. S2CID  206512562.
  33. ^ Rais Y, Zviran A, Geula S, Gafni O, Chomsky E, Viukov S, et al. (octubre de 2013). "Reprogramación directa determinista de células somáticas para pluripotencia". Nature . 502 (7469): 65–70. Bibcode :2013Natur.502...65R. doi :10.1038/nature12587. PMID  24048479. S2CID  4386833.
  34. ^ Selvaraj V, Plane JM, Williams AJ, Deng W (abril de 2010). "Cambio del destino celular: el notable aumento de las células madre pluripotentes inducidas y las tecnologías de reprogramación de linaje". Tendencias en biotecnología . 28 (4): 214–23. doi :10.1016/j.tibtech.2010.01.002. PMC 2843790 . PMID  20149468. 
  35. ^ ab Okita K, Nakagawa M, Hyenjong H, Ichisaka T, Yamanaka S (noviembre de 2008). "Generación de células madre pluripotentes inducidas en ratones sin vectores virales". Science . 322 (5903): 949–53. Bibcode :2008Sci...322..949O. doi : 10.1126/science.1164270 . PMID  18845712. S2CID  23735743.
  36. ^ Stadtfeld M, Nagaya M, Utikal J, Weir G, Hochedlinger K (noviembre de 2008). "Células madre pluripotentes inducidas generadas sin integración viral". Science . 322 (5903): 945–9. Bibcode :2008Sci...322..945S. doi :10.1126/science.1162494. PMC 3987909 . PMID  18818365. 
  37. ^ Woltjen K, Michael IP, Mohseni P, Desai R, Mileikovsky M, Hämäläinen R, et al. (abril de 2009). "La transposición de piggyBac reprograma fibroblastos a células madre pluripotentes inducidas". Nature . 458 (7239): 766–70. Bibcode :2009Natur.458..766W. doi :10.1038/nature07863. PMC 3758996 . PMID  19252478. 
  38. ^ Kaplan K (6 de marzo de 2009). "Los científicos afirman que las células madre han eliminado la amenaza del cáncer". Los Angeles Times .
  39. ^ Swaminathan N (30 de noviembre de 2007). «Células madre: esta vez sin cáncer». Scientific American News . Consultado el 11 de diciembre de 2007 .
  40. ^ Marión RM, Strati K, Li H, Murga M, Blanco R, Ortega S, et al. (agosto de 2009). "Una respuesta al daño del ADN mediada por p53 limita la reprogramación para asegurar la integridad genómica de las células iPS". Nature . 460 (7259): 1149–53. Bibcode :2009Natur.460.1149M. doi :10.1038/nature08287. PMC 3624089 . PMID  19668189. 
  41. ^ ab Zhao XY, Li W, Lv Z, Liu L, Tong M, Hai T, et al. (septiembre de 2009). "Las células iPS producen ratones viables a través de la complementación tetraploide". Nature . 461 (7260): 86–90. Bibcode :2009Natur.461...86Z. doi :10.1038/nature08267. PMID  19672241. S2CID  205217762.
  42. ^ Huangfu D, Maehr R, Guo W, Eijkelenboom A, Snitow M, Chen AE, Melton DA (julio de 2008). "La inducción de células madre pluripotentes por factores definidos se mejora enormemente con compuestos de moléculas pequeñas". Nature Biotechnology . 26 (7): 795–7. doi :10.1038/nbt1418. PMC 6334647 . PMID  18568017. 
  43. ^ ab Shi Y, Desponts C, Do JT, Hahm HS, Schöler HR, Ding S (noviembre de 2008). "Inducción de células madre pluripotentes a partir de fibroblastos embrionarios de ratón por Oct4 y Klf4 con compuestos de moléculas pequeñas". Cell Stem Cell . 3 (5): 568–74. doi : 10.1016/j.stem.2008.10.004 . PMID  18983970.
  44. ^ Cyranoski D (18 de julio de 2013). "Células madre reprogramadas utilizando solo sustancias químicas". Nature News . doi :10.1038/nature.2013.13416. S2CID  88247014 . Consultado el 22 de julio de 2013 .
  45. ^ Hou P, Li Y, Zhang X, Liu C, Guan J, Li H, et al. (agosto de 2013). "Células madre pluripotentes inducidas a partir de células somáticas de ratón mediante compuestos de moléculas pequeñas". Science . 341 (6146): 651–4. Bibcode :2013Sci...341..651H. doi :10.1126/science.1239278. PMID  23868920. S2CID  45685692.
  46. ^ "Un gran paso en la creación de mejores células madre a partir de tejido adulto". Science Daily . 19 de octubre de 2009 . Consultado el 30 de septiembre de 2013 .
  47. ^ Lin T, Ambasudhan R, Yuan X, Li W, Hilcove S, Abujarour R, et al. (noviembre de 2009). "Una plataforma química para mejorar la inducción de células madre pluripotentes humanas". Nature Methods . 6 (11): 805–8. doi :10.1038/nmeth.1393. PMC 3724527 . PMID  19838168. 
  48. ^ ab Zhou H, Wu S, Joo JY, Zhu S, Han DW, Lin T, et al. (mayo de 2009). "Generación de células madre pluripotentes inducidas utilizando proteínas recombinantes". Cell Stem Cell . 4 (5): 381–4. doi : 10.1016/j.stem.2009.04.005 . PMC 10182564 . PMID  19398399. 
  49. ^ Zhou W, Freed CR (noviembre de 2009). "La administración de genes adenovirales puede reprogramar fibroblastos humanos para convertirlos en células madre pluripotentes inducidas". Células madre . 27 (11): 2667–74. doi : 10.1002/stem.201 . PMID  19697349. S2CID  41418742.
  50. ^ David Cyranoski para Nature News. 29 de enero de 2014 El baño de ácido ofrece un camino fácil hacia las células madre
  51. ^ Tracy Vence para The Scientist. 11 de marzo de 2014 Llamado a retractarse de STAP
  52. ^ Lies E (4 de junio de 2014). "Investigador japonés acepta retirar artículo controvertido sobre células madre". Reuters . Consultado el 4 de junio de 2014 .
  53. ^ Nota de prensa (1 de abril de 2014). "Informe sobre la investigación del artículo de investigación sobre células STAP". RIKEN . Consultado el 2 de junio de 2014 .
  54. ^ abc Bao X, Zhu X, Liao B, Benda C, Zhuang Q, Pei D, et al. (abril de 2013). "MicroARN en la reprogramación de células somáticas". Current Opinion in Cell Biology . 25 (2): 208–14. doi :10.1016/j.ceb.2012.12.004. PMID  23332905.
  55. ^ Judson RL, Babiarz JE, Venere M, Blelloch R (mayo de 2009). "Los microARN específicos de células madre embrionarias promueven la pluripotencia inducida". Nature Biotechnology . 27 (5): 459–61. doi :10.1038/nbt.1535. PMC 2743930 . PMID  19363475. 
  56. ^ Guenther MG, Frampton GM, Soldner F, Hockemeyer D, Mitalipova M, Jaenisch R, Young RA (agosto de 2010). "Estructura de la cromatina y programas de expresión génica de células madre pluripotentes inducidas y embrionarias humanas". Cell Stem Cell . 7 (2): 249–57. doi :10.1016/j.stem.2010.06.015. PMC 3010384 . PMID  20682450. 
  57. ^ Kang L, Wang J, Zhang Y, Kou Z, Gao S (agosto de 2009). "Las células iPS pueden sustentar el desarrollo a término de embriones tetraploides complementados con blastocistos". Cell Stem Cell . 5 (2): 135–8. doi : 10.1016/j.stem.2009.07.001 . PMID  19631602.
  58. ^ ab Boland MJ, Hazen JL, Nazor KL, Rodriguez AR, Gifford W, Martin G, et al. (septiembre de 2009). "Ratones adultos generados a partir de células madre pluripotentes inducidas". Nature . 461 (7260): 91–4. Bibcode :2009Natur.461...91B. doi :10.1038/nature08310. PMID  19672243. S2CID  4423755.
  59. ^ Lister R, Pelizzola M, Kida YS, Hawkins RD, Nery JR, Hon G, et al. (marzo de 2011). "Puntos calientes de reprogramación epigenómica aberrante en células madre pluripotentes humanas inducidas". Nature . 471 (7336): 68–73. Bibcode :2011Natur.471...68L. doi :10.1038/nature09798. PMC 3100360 . PMID  21289626. 
  60. ^ Knoepfler PS (mayo de 2009). "Desconstrucción de la tumorigenicidad de las células madre: una hoja de ruta hacia una medicina regenerativa segura". Células madre . 27 (5): 1050–6. doi :10.1002/stem.37. PMC 2733374 . PMID  19415771. 
  61. ^ Nori S, Okada Y, Yasuda A, Tsuji O, Takahashi Y, Kobayashi Y, et al. (octubre de 2011). "Las neuroesferas derivadas de células madre pluripotentes inducidas por humanos injertadas promueven la recuperación funcional motora después de una lesión de la médula espinal en ratones". Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 108 (40): 16825–30. Bibcode :2011PNAS..10816825N. doi : 10.1073/pnas.1108077108 . PMC 3189018 . PMID  21949375. 
  62. ^ Nori S, Okada Y, Nishimura S, Sasaki T, Itakura G, Kobayashi Y, et al. (marzo de 2015). "Cuestiones de seguridad a largo plazo de la terapia celular basada en iPSC en un modelo de lesión de la médula espinal: transformación oncogénica con transición epitelial-mesenquimal". Informes de células madre . 4 (3): 360–73. doi :10.1016/j.stemcr.2015.01.006. PMC 4375796 . PMID  25684226. 
  63. ^ Aoi T, Yae K, Nakagawa M, Ichisaka T, Okita K, Takahashi K, et al. (agosto de 2008). "Generación de células madre pluripotentes a partir de células de hígado y estómago de ratones adultos". Science . 321 (5889): 699–702. Bibcode :2008Sci...321..699A. doi :10.1126/science.1154884. hdl : 2433/124215 . PMID  18276851. S2CID  52869734.
  64. ^ Gutierrez-Aranda I, Ramos-Mejia V, Bueno C, Munoz-Lopez M, Real PJ, Mácia A, et al. (septiembre de 2010). "Las células madre pluripotentes humanas inducidas desarrollan teratomas de manera más eficiente y rápida que las células madre embrionarias humanas, independientemente del sitio de inyección". Células madre . 28 (9): 1568–70. doi :10.1002/stem.471. PMC 2996086 . PMID  20641038. 
  65. ^ Zhao T, Zhang ZN, Rong Z, Xu Y (mayo de 2011). "Inmunogenicidad de células madre pluripotentes inducidas". Nature . 474 (7350): 212–5. CiteSeerX 10.1.1.864.8029 . doi :10.1038/nature10135. PMID  21572395. S2CID  4416964. 
  66. ^ Araki R, Uda M, Hoki Y, Sunayama M, Nakamura M, Ando S, et al. (febrero de 2013). "Inmunogenicidad insignificante de células terminalmente diferenciadas derivadas de células madre pluripotentes o embrionarias inducidas". Nature . 494 (7435): 100–4. Bibcode :2013Natur.494..100A. doi :10.1038/nature11807. PMID  23302801. S2CID  205232231.
  67. ^ Shalom-Feuerstein R, Serror L, Aberdam E, Müller FJ, van Bokhoven H, Wiman KG, et al. (febrero de 2013). "La diferenciación epitelial alterada de células madre pluripotentes inducidas de pacientes relacionados con displasia ectodérmica es rescatada por el pequeño compuesto APR-246/PRIMA-1MET". Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 110 (6): 2152–6. Bibcode :2013PNAS..110.2152S. doi : 10.1073/pnas.1201753109 . PMC 3568301 . PMID  23355677. 
  68. ^ Park IH, Arora N, Huo H, Maherali N, Ahfeldt T, Shimamura A, et al. (Septiembre de 2008). "Células madre pluripotentes inducidas por enfermedades específicas". Celúla . 134 (5): 877–86. doi :10.1016/j.cell.2008.07.041. PMC 2633781 . PMID  18691744. 
  69. ^ Freedman BS, Lam AQ, Sundsbak JL, Iatrino R, Su X, Koon SJ, et al. (octubre de 2013). "Policistina-2 ciliar reducida en células madre pluripotentes inducidas de pacientes con enfermedad renal poliquística con mutaciones PKD1". Revista de la Sociedad Americana de Nefrología . 24 (10): 1571–86. doi :10.1681/ASN.2012111089. PMC 3785271 . PMID  24009235. 
  70. ^ Dolmetsch R, Geschwind D (junio de 2011). "El cerebro humano en una placa: la promesa de las neuronas derivadas de iPSC". Cell . 145 (6): 831–4. doi : 10.1016/j.cell.2011.05.034 . PMC 3691069 . PMID  21663789. 
  71. ^ Grskovic M, Javaherian A, Strulovici B, Daley GQ (noviembre de 2011). "Células madre pluripotentes inducidas: oportunidades para el modelado de enfermedades y el descubrimiento de fármacos". Nature Reviews. Drug Discovery . 10 (12): 915–29. doi :10.1038/nrd3577. PMID  22076509. S2CID  7945956.
  72. ^ Shi Y, Inoue H, Wu JC, Yamanaka S (febrero de 2017). "Tecnología de células madre pluripotentes inducidas: una década de progreso". Nat Rev Drug Discov . 16 (2): 115–30. doi :10.1038/nrd.2016.245. PMC 6416143 . PMID  27980341. 
  73. ^ Gerlin A (5 de diciembre de 2012). "Roche, Pfizer, Sanofi planean un banco de células madre de 72,7 millones de dólares". Bloomberg.com . Consultado el 23 de diciembre de 2012 .
  74. ^ Shinnawi R, Huber I, Maizels L, Shaheen N, Gepstein A, Arbel G, et al. (octubre de 2015). "Monitoreo de cardiomiocitos derivados de células madre pluripotentes inducidas por humanos con reporteros fluorescentes de voltaje y calcio codificados genéticamente". Informes de células madre . 5 (4): 582–96. doi :10.1016/j.stemcr.2015.08.009. PMC 4624957 . PMID  26372632. 
  75. ^ Shaheen N, Shiti A, Huber I, Shinnawi R, Arbel G, Gepstein A, et al. (junio de 2018). "Láminas de células cardíacas derivadas de células madre pluripotentes inducidas por humanos que expresan un indicador de voltaje codificado genéticamente para estudios farmacológicos y de arritmia". Informes de células madre . 10 (6): 1879–1894. doi :10.1016/j.stemcr.2018.04.006. PMC 5989818 . PMID  29754959. 
  76. ^ Sharma, Arun; Burridge, Paul W.; McKeithan, Wesley L.; Serrano, Ricardo; Shukla, Praveen; Sayed, Nazish; Churko, Jared M.; Kitani, Tomoya; Wu, Haodi; Holmström, Alexandra; Matsa, Elena (15 de febrero de 2017). "Cribado de alto rendimiento de cardiotoxicidad por inhibidores de la tirosina quinasa con células madre pluripotentes inducidas humanas". Science Translational Medicine . 9 (377): eaaf2584. doi :10.1126/scitranslmed.aaf2584. ISSN  1946-6242. PMC 5409837 . PMID  28202772. 
  77. ^ McKeithan, Wesley L.; Savchenko, Alex; Yu, Michael S.; Cerignoli, Fabio; Bruyneel, Arne AN; Price, Jeffery H.; Colas, Alexandre R.; Miller, Evan W.; Cashman, John R.; Mercola, Mark (2017). "Una plataforma automatizada para la evaluación de la arritmia congénita e inducida por fármacos con cardiomiocitos derivados de hiPSC". Frontiers in Physiology . 8 : 766. doi : 10.3389/fphys.2017.00766 . ISSN  1664-042X. PMC 5641590 . PMID  29075196. 
  78. ^ Serrano, Ricardo; Feyen, Dries AM; Bruyneel, Arne AN; Hnatiuk, Anna P.; Vu, Michelle M.; Amatya, Prashila L.; Perea-Gil, Isaac; Prado, Maricela; Seeger, Timón; Wu, José C.; Karakikes, Ioannis; Mercola, Mark (enero de 2023). "Una plataforma de aprendizaje profundo para evaluar el riesgo de proarritmia farmacológica". Célula madre celular . 30 (1): 86–95.e4. doi :10.1016/j.stem.2022.12.002. PMC 9924077 . PMID  36563695. 
  79. ^ Baker M (3 de julio de 2013). «Hígado humano en miniatura cultivado en ratones». Nature . doi :10.1038/nature.2013.13324. S2CID  87064973 . Consultado el 19 de julio de 2013 .
  80. ^ Takebe T, Sekine K, Enomura M, Koike H, Kimura M, Ogaeri T, et al. (julio de 2013). "Hígado humano vascularizado y funcional a partir de un trasplante de yema de órgano derivado de iPSC". Nature . 499 (7459): 481–4. Bibcode :2013Natur.499..481T. doi :10.1038/nature12271. PMID  23823721. S2CID  4423004.
  81. ^ Chen Y, Lüttmann FF, Schoger E, Schöler HR, Zelarayán LC, Kim KP, et al. (septiembre de 2021). "La reprogramación reversible de cardiomiocitos a un estado fetal impulsa la regeneración cardíaca en ratones". Science . 373 (6562): 1537–1540. Bibcode :2021Sci...373.1537C. doi :10.1126/science.abg5159. PMID  34554778. S2CID  237617229.
  82. ^ Mullin E (28 de enero de 2014). "Investigadores reparan retinas en ratones con células madre libres de virus". fiercebiotech.com . Consultado el 17 de febrero de 2014 .
  83. ^ Park TS, Bhutto I, Zimmerlin L, Huo JS, Nagaria P, Miller D, et al. (enero de 2014). "Los progenitores vasculares de células madre pluripotentes inducidas derivadas de la sangre del cordón umbilical poseen una capacidad aumentada para regenerar la vasculatura retiniana isquémica". Circulation . 129 (3): 359–72. doi :10.1161/CIRCULATIONAHA.113.003000. PMC 4090244 . PMID  24163065. 
  84. ^ Tang H, Sha H, Sun H, Wu X, Xie L, Wang P, et al. (octubre de 2013). "Seguimiento de células madre neuronales derivadas de células madre pluripotentes inducidas en el sistema nervioso central de ratas y monos". Reprogramación celular . 15 (5): 435–42. doi :10.1089/cell.2012.0081. PMC 3787483 . PMID  24020696. 
  85. ^ Burridge PW, Matsa E, Shukla P, Lin ZC, Churko JM, Ebert AD, et al. (agosto de 2014). "Generación químicamente definida de cardiomiocitos humanos". Nature Methods . 11 (8): 855–60. doi :10.1038/nmeth.2999. PMC 4169698 . PMID  24930130. 
  86. ^ Feyen, seca AM; McKeithan, Wesley L.; Bruyneel, Arne AN; Spiering, Sean; Hörmann, Larissa; Ulmer, Bärbel; Zhang, Hui; Briganti, Francesca; Schweizer, Michaela; Hegyi, Bence; Liao, Zhandi (21 de julio de 2020). "Los medios de maduración metabólica mejoran la función fisiológica de los cardiomiocitos humanos derivados de iPSC". Informes celulares . 32 (3): 107925. doi : 10.1016/j.celrep.2020.107925. ISSN  2211-1247. PMC 7437654 . PMID  32697997. 
  87. ^ Willems E, Spiering S, Davidovics H, Lanier M, Xia Z, Dawson M, et al. (agosto de 2011). "Los inhibidores de moléculas pequeñas de la vía Wnt promueven de forma potente los cardiomiocitos del mesodermo derivado de células madre embrionarias humanas". Circulation Research . 109 (4): 360–4. doi :10.1161/CIRCRESAHA.111.249540. PMC 3327303 . PMID  21737789. 
  88. ^ Yazawa M, Hsueh B, Jia X, Pasca AM, Bernstein JA, Hallmayer J, Dolmetsch RE (marzo de 2011). "Uso de células madre pluripotentes inducidas para investigar fenotipos cardíacos en el síndrome de Timothy". Nature . 471 (7337): 230–4. Bibcode :2011Natur.471..230Y. doi :10.1038/nature09855. PMC 3077925 . PMID  21307850. 
  89. ^ Itzhaki I, Maizels L, Huber I, Zwi-Dantsis L, Caspi O, Winterstern A, et al. (marzo de 2011). "Modelado del síndrome de QT largo con células madre pluripotentes inducidas". Nature . 471 (7337): 225–9. Bibcode :2011Natur.471..225I. doi :10.1038/nature09747. PMID  21240260. S2CID  4384573.
  90. ^ Sharma A, Burridge PW, McKeithan WL, Serrano R, Shukla P, Sayed N, et al. (febrero de 2017). "Cribado de alto rendimiento de cardiotoxicidad por inhibidores de la tirosina quinasa con células madre pluripotentes inducidas humanas". Science Translational Medicine . 9 (377): eaaf2584. doi :10.1126/scitranslmed.aaf2584. PMC 5409837 . PMID  28202772. 
  91. ^ McKeithan, Wesley L.; Feyen, Dries AM; Bruyneel, Arne AN; Okolotowicz, Karl J.; Ryan, Daniel A.; Sampson, Kevin J.; Potet, Franck; Savchenko, Alex; Gómez-Galeno, Jorge; Vu, Michelle; Serrano, Ricardo (5 de noviembre de 2020). "Reingeniería de un fármaco antiarrítmico utilizando cardiomiocitos de células madre pluripotentes de pacientes para mejorar el potencial terapéutico y reducir la toxicidad". Cell Stem Cell . 27 (5): 813–821.e6. doi :10.1016/j.stem.2020.08.003. ISSN  1875-9777. PMC 7655512 . PMID  32931730. 
  92. ^ "iPS から心筋細胞製造 タカラバイオとベンチャー".日本経済新聞 電子版(en japonés). 24 de junio de 2014 . Consultado el 8 de noviembre de 2019 .
  93. ^ "iPS で心臓治療了承 高難度の再生医療へ一歩".日本経済新聞 電子版(en japonés). 16 de mayo de 2018 . Consultado el 8 de noviembre de 2019 .
  94. ^ "ｉＰＳ細胞の心筋シート移植、臨床研究を国が大筋了承：朝日新聞デジタル".朝日新聞デジタル(en japonés). 16 de mayo de 2018 . Consultado el 8 de noviembre de 2019 .[ enlace muerto permanente ]
  95. ^ Wei H, Wang C, Guo R, Takahashi K, Naruse K (diciembre de 2019). "Desarrollo de un modelo de cardiopatía isquémica utilizando cardiomiocitos diferenciados a partir de células madre pluripotentes inducidas humanas". Comunicaciones de investigación bioquímica y biofísica . 520 (3): 600–605. doi : 10.1016/j.bbrc.2019.09.119 . PMID  31623826.
  96. ^ "Las primeras transfusiones de sangre "fabricada" están previstas para 2016". Gizmag.com. 23 de abril de 2014. Consultado el 23 de abril de 2014 .
  97. ^ Garber K (septiembre de 2015). "RIKEN suspende el primer ensayo clínico con células madre pluripotentes inducidas". Nature Biotechnology . 33 (9): 890–1. doi :10.1038/nbt0915-890. PMID  26348942. S2CID  205271169.
  98. ^ Tobita M, Konomi K, Torashima Y, Kimura K, Taoka M, Kaminota M (junio de 2016). "Los desafíos de la medicina regenerativa traslacional en Japón: actuar sobre la seguridad de la medicina regenerativa". Terapia regenerativa . 4 : 78–81. doi : 10.1016/j.reth.2016.04.001 . PMC 6581824 . PMID  31245489. 
  99. ^ Riken Center for Developmental Biology. "Información sobre el estudio piloto propuesto sobre la seguridad y viabilidad del trasplante de láminas de células del epitelio pigmentario de la retina (EPR) derivadas de hiPSC autólogas en pacientes con degeneración macular neovascular relacionada con la edad". Investigación . Archivado desde el original el 26 de junio de 2013 . Consultado el 23 de julio de 2013 .
  100. ^ ab Gallagher J (19 de julio de 2013). "Japón aprueba un ensayo pionero con células madre adultas". BBC News . Consultado el 23 de julio de 2013 .
  101. ^ "Primer trasplante de células epiteliales pigmentarias derivadas de células iPS de un donante en un paciente con DMAE". RIKEN Center for Developmental Biology. 4 de abril de 2017. Archivado desde el original el 6 de septiembre de 2017 . Consultado el 6 de septiembre de 2017 .
  102. ^ "Se informa de la primera reacción adversa grave a un trasplante de células de retina derivadas de iPS". The Japan Times Online . 17 de enero de 2018. Archivado desde el original el 27 de enero de 2018 . Consultado el 27 de enero de 2018 .
  103. ^ Deinsberger J, Reisinger D, Weber B (11 de septiembre de 2020). "Tendencias globales en ensayos clínicos con células madre pluripotentes: un análisis sistemático de múltiples bases de datos". npj Regenerative Medicine . 5 (1): 15. doi : 10.1038/s41536-020-00100-4 . PMC 7486930 . PMID  32983575. 
  104. ^ Knoepfler P (25 de enero de 2021). "¿Qué son las células madre pluripotentes inducidas o células IPS y sus perspectivas clínicas?". The Niche . Consultado el 7 de febrero de 2021 .
  105. ^ ab Koga K, Wang B, Kaneko S (2020). "Estado actual y perspectivas futuras de las células madre pluripotentes inducidas editadas por HLA". Inflamación y regeneración . 40 : 23. doi : 10.1186/s41232-020-00132-9 . PMC 7528263 . PMID  33014207.  Este artículo incorpora texto de esta fuente, que está disponible bajo la licencia CC BY 4.0.
  106. ^ Haridy R (23 de octubre de 2017). "El tratamiento antienvejecimiento con células madre demuestra ser exitoso en los primeros ensayos en humanos". New Atlas .
  107. ^ Sarkar TJ, Quarta M, Mukherjee S, Colville A, Paine P, Doan L, et al. (marzo de 2020). "La expresión transitoria no integradora de factores de reprogramación nuclear promueve una mejora multifacética del envejecimiento en células humanas". Nature Communications . 11 (1): 1545. Bibcode :2020NatCo..11.1545S. doi :10.1038/s41467-020-15174-3. PMC 7093390 . PMID  32210226. 
Wikimedia Commons tiene medios relacionados con Células madre pluripotentes inducidas .
  • Centro de Investigación y Aplicación de Células iPS, Universidad de Kioto
  • Con pocos factores, las células adultas adquieren el carácter de células madre embrionarias
  • Generación de células iPS a partir de MEFS mediante la expresión forzada de Sox-2, Oct-4, c-Myc y Klf4
  • Vídeo de 2 minutos de BSCRF sobre células madre pluripotentes inducidas Archivado el 18 de abril de 2011 en Wayback Machine
  • Vídeo de 20 minutos: El descubrimiento y el futuro de las células madre pluripotentes inducidas (iPS) por Yamanaka 8 de enero de 2008
  • Hoja informativa sobre la reprogramación
  • Taller práctico de la Universidad de Oxford sobre tecnología de células madre pluripotentes Archivado el 8 de abril de 2016 en Wayback Machine
  • Allen Cell Explorer: visualización tridimensional realista basada en datos de una hiPSC viva en su estado pluripotente
  • Curso iPSC de CamBioScience Archivado el 23 de abril de 2019 en Wayback Machine
Obtenido de "https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Célula_madre_pluripotente_inducida&oldid=1250494301"