Tinción tricrómica

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La tinción tricrómica es un método de tinción histológica que utiliza dos o más colorantes ácidos junto con un poliácido . La tinción diferencia los tejidos al teñirlos con colores contrastantes. Aumenta el contraste de las características microscópicas en las células y los tejidos , lo que los hace más fáciles de ver cuando se observan a través de un microscopio .

La palabra tricrómico significa "tres colores". El primer protocolo de tinción que se describió como "tricrómico" fue la tinción tricrómica de Mallory , que tiñó de forma diferencial los eritrocitos con un color rojo, el tejido muscular con un color rojo y el colágeno con un color azul. Otros protocolos de tinción tricrómica son la tinción tricrómica de Masson , la tinción tricrómica de Lillie y la tinción tricrómica de Gömöri .

Sin la tinción tricrómica, distinguir una característica de otra puede ser extremadamente difícil. El tejido muscular liso , por ejemplo, es difícil de diferenciar del colágeno. Una tinción tricrómica puede colorear el tejido muscular de rojo y las fibras de colágeno de verde o azul. Las biopsias de hígado pueden tener fibras de colágeno finas entre las células hepáticas, y la cantidad de colágeno puede estimarse en función del método de tinción. Los métodos tricrómicos se utilizan ahora para diferenciar el músculo del colágeno, las células alfa de la hipófisis de las células beta, la fibrina del colágeno y las mitocondrias en secciones de músculo fresco congelado, entre otras aplicaciones. Ayuda a identificar aumentos en el tejido colágeno (es decir, cambios fibróticos) como en la cirrosis hepática y a distinguir tumores que surgen de células musculares y fibroblastos. ^[1]

Las técnicas de tinción tricrómica emplean dos o más colorantes ácidos . Normalmente, los colorantes ácidos tiñen las mismas proteínas básicas, pero al aplicarlos secuencialmente, se puede manipular el patrón de tinción. Se utiliza un poliácido (como el ácido fosfomolíbdico o el ácido fosfotúngstico ) para eliminar el colorante de forma selectiva. Se cree que los poliácidos se comportan como colorantes con un alto peso molecular : desplazan el colorante que se elimina fácilmente del colágeno. ^{[ cita requerida ]}

Generalmente, primero se aplica un colorante rojo en ácido acético diluido para teñir todos los componentes. Luego se aplica un poliácido para eliminar el colorante rojo del colágeno y algunos otros componentes por desplazamiento. Se aplica un segundo colorante ácido (azul o verde) en ácido acético diluido que, a su vez, desplaza el poliácido, lo que da como resultado que el colágeno se tiña de un color que contrasta con el colorante inicial utilizado. Si se van a teñir eritrocitos, se aplica un colorante amarillo o naranja de bajo peso molecular antes de teñir con el colorante rojo. Por lo general, se aplica a partir de una solución saturada en etanol al 80% y, a menudo, junto con ácido pícrico (en sí mismo un colorante) y un poliácido. Los métodos aprovechan pequeñas diferencias en la reacción del tejido a los colorantes, la densidad, la accesibilidad, etc. ^{[ cita requerida ]}

Las tinciones tricrómicas en las que se aplican colorantes y un poliácido de forma secuencial se denominan tricrómicas de varios pasos . En los métodos de "un solo paso", todos los colorantes (con o sin poliácido) se combinan en una única solución. Uno de los métodos de un solo paso más antiguos para la tinción tricrómica es el método de van Gieson, que tiñe el músculo y el citoplasma de amarillo y el colágeno de rojo. Otro es la tinción tricrómica de Gömöri , que imita de cerca la tinción tricrómica de Masson. En los métodos "yellowsolve", primero se aplica un colorante rojo en ácido acético diluido, luego la sección se deshidrata muy bien para garantizar que no quede humedad. Luego, el colorante rojo se reemplaza por un colorante amarillo en un disolvente, como cellosolve (2-etoxi-etanol). El nombre yellowsolve es una mezcla de los términos yellow y cellosolve . La floxina-tartrazina de Lendrum para inclusiones celulares es un ejemplo de tinción yellowsolve. ^{[ cita requerida ]}

Entre los colorantes utilizados para la tinción tricrómica se encuentran:

Rojo

Fucsina ácida , xilidina ponceau, cromótropo 2R, escarlata de Biebrich , ponceau 6R, floxina

Azul y verde

Verde claro SF amarillento, verde rápido FCF , azul de metilo , azul agua

Amarillo

Ácido pícrico , naranja G , amarillo de Martius , tartrazina , amarillo de molienda

• Tinción por dispersión
• Microscopía
• Microscopía de contraste de fases

• Baker JR (1958) Principles of biological Microtechnique. Londres: Methuen. (También reimpresión en rústica, Franklin Classics Trade Press, EE. UU., 2018. ISBN 978-0353331044.)
• Horobin RW (1982) Histoquímica. Stuttgart: Gustav Fischer. ISBN 3437107003.
• Horobin RW (1988) Comprensión de la histoquímica. Chichester: Ellis Horwood. ISBN 9780470210604.
• Kiernan JA (2015) Métodos histológicos e histoquímicos, 5.ª ed. Banbury, Reino Unido: Scion. ISBN 9781907904325.
• Prento P. (2009) Tinción de macromoléculas: posibles mecanismos y ejemplos. Biotech. Histochem. 84: 139-158.
• Puchtler H. Isler H. (1958) El efecto del ácido fosfomolíbdico en la tinción de los tejidos conectivos con diversos colorantes. J. Histochem. Cytochem. 6: 265-270.
• Reid PE. Iagallo M., Nehr S., Jankunis M., Morrow P. (1993) Mecanismo de las técnicas de tejido conectivo. 1. El efecto de la concentración de colorante y el tiempo de tinción en los procedimientos con colorantes aniónicos. Histochem. J. 25: 821-829.

Medios relacionados con Tinción tricrómica en Wikimedia Commons

• Protocolo tricrómico de Masson