Cultivo celular
Proceso mediante el cual se cultivan células en condiciones controladas.

Cultivo de células en una pequeña placa de Petri
Células epiteliales en cultivo, teñidas para queratina (rojo) y ADN (verde)

El cultivo celular o cultivo de tejidos es el proceso mediante el cual las células se cultivan en condiciones controladas, generalmente fuera de su entorno natural. Una vez que las células de interés se han aislado del tejido vivo , se pueden mantener posteriormente en condiciones cuidadosamente controladas. Deben mantenerse a temperatura corporal (37 °C) en una incubadora. [1] Estas condiciones varían para cada tipo de célula, pero generalmente consisten en un recipiente adecuado con un sustrato o medio rico que suministra los nutrientes esenciales ( aminoácidos , carbohidratos , vitaminas , minerales ), factores de crecimiento , hormonas y gases ( CO 2 , O 2 ), y regula el entorno fisicoquímico ( tampón de pH , presión osmótica , temperatura ). La mayoría de las células requieren una superficie o un sustrato artificial para formar un cultivo adherente como una monocapa (una sola célula de espesor), mientras que otras pueden cultivarse flotando libremente en un medio como un cultivo en suspensión . [2] Esto generalmente se facilita mediante el uso de un medio de crecimiento líquido, semisólido o sólido , como caldo o agar . El término cultivo de tejidos se refiere comúnmente al cultivo de células y tejidos animales, y el término más específico de cultivo de tejidos vegetales se utiliza para referirse a las plantas. La vida útil de la mayoría de las células está determinada genéticamente, pero algunas células cultivadas en cultivos celulares se han "transformado" en células inmortales que se reproducirán indefinidamente si se proporcionan las condiciones óptimas.

En la práctica, el término "cultivo celular" se refiere ahora al cultivo de células derivadas de eucariotas multicelulares , especialmente células animales , en contraste con otros tipos de cultivo que también cultivan células, como el cultivo de tejidos vegetales , el cultivo de hongos y el cultivo microbiológico (de microbios ). El desarrollo histórico y los métodos del cultivo celular están estrechamente relacionados con los del cultivo de tejidos y el cultivo de órganos . El cultivo viral también está relacionado, con las células como huéspedes de los virus.

La técnica de laboratorio de mantener líneas celulares vivas (una población de células descendientes de una sola célula y que contienen la misma composición genética) separadas de su fuente de tejido original se volvió más sólida a mediados del siglo XX. [3] [4]

Historia

El fisiólogo inglés del siglo XIX Sydney Ringer desarrolló soluciones salinas que contenían cloruros de sodio, potasio, calcio y magnesio adecuadas para mantener el latido del corazón de un animal aislado fuera del cuerpo. [5] En 1885, Wilhelm Roux extrajo una sección de la placa medular de un pollo embrionario y la mantuvo en una solución salina tibia durante varios días, estableciendo el principio básico del cultivo de tejidos. En 1907, el zoólogo Ross Granville Harrison demostró el crecimiento de células embrionarias de rana que darían lugar a células nerviosas en un medio de linfa coagulada . En 1913, E. Steinhardt, C. Israeli y RA Lambert cultivaron el virus vaccinia en fragmentos de tejido corneal de cobaya . [6] En 1996, el primer uso de tejido regenerativo se utilizó para reemplazar una pequeña longitud de uretra, lo que llevó a la comprensión de que la técnica de obtener muestras de tejido, cultivarlo fuera del cuerpo sin un andamio y volver a aplicarlo, puede usarse solo para pequeñas distancias de menos de 1 cm. [7] [8] [9] Ross Granville Harrison , trabajando en la Escuela de Medicina Johns Hopkins y luego en la Universidad de Yale , publicó los resultados de sus experimentos de 1907 a 1910, estableciendo la metodología del cultivo de tejidos . [10]

Gottlieb Haberlandt fue el primero en señalar las posibilidades del cultivo de tejidos aislados, el cultivo de tejidos vegetales . [11] Sugirió que las potencialidades de las células individuales a través del cultivo de tejidos, así como las influencias recíprocas de los tejidos entre sí, podrían determinarse mediante este método. Desde las afirmaciones originales de Haberlandt, se han realizado métodos para el cultivo de tejidos y células, lo que ha llevado a descubrimientos significativos en biología y medicina. Presentó su idea original de totipotencialidad en 1902, afirmando que "Teóricamente todas las células vegetales son capaces de dar lugar a una planta completa". [12] [13] [14] El término cultivo de tejidos fue acuñado por el patólogo estadounidense Montrose Thomas Burrows . [15]

Las técnicas de cultivo celular avanzaron significativamente en las décadas de 1940 y 1950 para apoyar la investigación en virología . El crecimiento de virus en cultivos celulares permitió la preparación de virus purificados para la fabricación de vacunas . La vacuna inyectable contra la polio desarrollada por Jonas Salk fue uno de los primeros productos producidos en masa utilizando técnicas de cultivo celular. Esta vacuna fue posible gracias a la investigación en cultivo celular de John Franklin Enders , Thomas Huckle Weller y Frederick Chapman Robbins , quienes recibieron un Premio Nobel por su descubrimiento de un método para cultivar el virus en cultivos de células de riñón de mono . El cultivo celular ha contribuido al desarrollo de vacunas para muchas enfermedades. [1]

Uso moderno

Células cultivadas que crecen en un medio de crecimiento.

En el uso moderno, "cultivo de tejidos" se refiere generalmente al crecimiento de células a partir de un tejido de un organismo multicelular in vitro . Estas células pueden ser células aisladas de un organismo donante ( células primarias ) o una línea celular inmortalizada . Las células se bañan en un medio de cultivo, que contiene nutrientes esenciales y fuentes de energía necesarias para la supervivencia de las células. [16] Por lo tanto, en su sentido más amplio, "cultivo de tejidos" a menudo se usa indistintamente con "cultivo celular". Por otro lado, el significado estricto de "cultivo de tejidos" se refiere al cultivo de trozos de tejido, es decir, cultivo de explantos .

El cultivo de tejidos es una herramienta importante para el estudio de la biología de las células de organismos multicelulares. Proporciona un modelo in vitro del tejido en un entorno bien definido que puede manipularse y analizarse fácilmente. En el cultivo de tejidos animales, las células pueden cultivarse como monocapas bidimensionales (cultivo convencional) o dentro de estructuras fibrosas o geles para lograr estructuras tridimensionales más naturales similares a los tejidos (cultivo 3D). Eric Simon, en un informe de subvención del NIH SBIR de 1988, demostró que el electrohilado podía utilizarse para producir estructuras fibrosas poliméricas a escala nanométrica y submicrométrica específicamente diseñadas para su uso como sustratos de células y tejidos in vitro . Este uso temprano de redes fibrosas electrohiladas para el cultivo celular y la ingeniería de tejidos demostró que varios tipos de células se adherirían y proliferarían sobre las fibras de policarbonato. Se observó que, a diferencia de la morfología aplanada que se observa típicamente en el cultivo 2D, las células cultivadas en fibras electrohiladas exhibieron una morfología tridimensional más redondeada que generalmente se observa en los tejidos in vivo . [17]

El cultivo de tejidos vegetales , en particular, se ocupa del crecimiento de plantas enteras a partir de pequeños trozos de tejido vegetal, cultivados en un medio. [18]

Conceptos en el cultivo de células de mamíferos

Aislamiento de células

Las células se pueden aislar de los tejidos para su cultivo ex vivo de varias maneras. Las células se pueden purificar fácilmente de la sangre; sin embargo, solo los glóbulos blancos son capaces de crecer en cultivo. Las células se pueden aislar de tejidos sólidos mediante la digestión de la matriz extracelular utilizando enzimas como la colagenasa , la tripsina o la pronasa , antes de agitar el tejido para liberar las células en suspensión. [19] [20] Alternativamente, se pueden colocar trozos de tejido en medios de crecimiento y las células que crecen están disponibles para el cultivo. Este método se conoce como cultivo de explantos .

Las células que se cultivan directamente de un sujeto se conocen como células primarias. Con excepción de algunas derivadas de tumores, la mayoría de los cultivos de células primarias tienen una vida útil limitada.

Una línea celular establecida o inmortalizada ha adquirido la capacidad de proliferar indefinidamente, ya sea mediante mutación aleatoria o modificación deliberada, como la expresión artificial del gen de la telomerasa . Numerosas líneas celulares están bien establecidas como representativas de tipos celulares particulares .

Mantenimiento de células en cultivo

La mayoría de las células primarias aisladas experimentan un proceso de senescencia y dejan de dividirse después de un cierto número de duplicaciones de su población, aunque generalmente conservan su viabilidad (descrito como el límite de Hayflick ).

Una botella de medio de cultivo celular DMEM

Aparte de la temperatura y la mezcla de gases, el factor más comúnmente variado en los sistemas de cultivo es el medio de crecimiento celular . Las recetas para los medios de crecimiento pueden variar en pH , concentración de glucosa, factores de crecimiento y la presencia de otros nutrientes. Los factores de crecimiento utilizados para complementar los medios a menudo se derivan del suero de sangre animal, como suero bovino fetal (FBS), suero bovino de ternera, suero equino y suero porcino. Una complicación de estos ingredientes derivados de la sangre es el potencial de contaminación del cultivo con virus o priones , particularmente en aplicaciones de biotecnología médica . La práctica actual es minimizar o eliminar el uso de estos ingredientes siempre que sea posible y utilizar lisado de plaquetas humanas (hPL). [21] Esto elimina la preocupación de la contaminación entre especies cuando se usa FBS con células humanas. hPL ha surgido como una alternativa segura y confiable como reemplazo directo de FBS u otro suero animal. Además, se pueden usar medios definidos químicamente para eliminar cualquier rastro de suero (humano o animal), pero esto no siempre se puede lograr con diferentes tipos de células. Las estrategias alternativas incluyen obtener sangre animal de países con un riesgo mínimo de EEB / EET , como Estados Unidos, Australia y Nueva Zelanda, [22] y utilizar concentrados de nutrientes purificados derivados del suero en lugar de suero animal completo para el cultivo celular. [23]

La densidad de siembra (número de células por volumen de medio de cultivo) desempeña un papel fundamental para algunos tipos de células. Por ejemplo, una densidad de siembra más baja hace que las células de la granulosa muestren producción de estrógeno, mientras que una densidad de siembra más alta las hace aparecer como células luteínicas de la teca productoras de progesterona . [24]

Las células se pueden cultivar en suspensión o en cultivos adherentes . [25] Algunas células viven naturalmente en suspensión, sin estar adheridas a una superficie, como las células que existen en el torrente sanguíneo. También hay líneas celulares que se han modificado para poder sobrevivir en cultivos en suspensión para que puedan cultivarse a una densidad mayor que la que permitirían las condiciones adherentes. Las células adherentes requieren una superficie, como un plástico de cultivo de tejidos o un microportador , que puede estar recubierto con componentes de la matriz extracelular (como colágeno y laminina) para aumentar las propiedades de adhesión y proporcionar otras señales necesarias para el crecimiento y la diferenciación. La mayoría de las células derivadas de tejidos sólidos son adherentes. Otro tipo de cultivo adherente es el cultivo organotípico , que implica el crecimiento de células en un entorno tridimensional (3-D) en lugar de placas de cultivo bidimensionales. Este sistema de cultivo 3D es bioquímica y fisiológicamente más similar al tejido in vivo , pero es técnicamente difícil de mantener debido a muchos factores (por ejemplo, la difusión). [26]

Medios basales para cultivo celular

Existen distintos tipos de medios de cultivo celular que se utilizan rutinariamente en las ciencias de la vida, incluidos los siguientes:

Componentes de los medios de cultivo celular

ComponenteFunción
Fuente de carbono ( glucosa / glutamina )Fuente de energía
AminoácidoBloques constructores de proteínas
VitaminasPromover la supervivencia y el crecimiento celular.
Solución salina equilibradaUna mezcla isotónica de iones para mantener la presión osmótica óptima dentro de las células y proporcionar iones metálicos esenciales para actuar como cofactores para reacciones enzimáticas, adhesión celular, etc.
Colorante rojo fenolIndicador de pH . El color del rojo fenol cambia de naranja/rojo a un pH de 7 a 7,4 a amarillo a un pH ácido (más bajo) y a violeta a un pH básico (más alto).
Tampón de bicarbonato/HEPESSe utiliza para mantener un pH equilibrado en el medio.

Condiciones típicas de crecimiento

Parámetro
Temperatura37 °C
CO25%
Humedad relativa95%

Contaminación cruzada de líneas celulares

La contaminación cruzada de líneas celulares puede ser un problema para los científicos que trabajan con células cultivadas. [27] Los estudios sugieren que entre el 15 y el 20% de las veces, las células utilizadas en experimentos han sido identificadas erróneamente o contaminadas con otra línea celular. [28] [29] [30] Incluso se han detectado problemas con la contaminación cruzada de líneas celulares en líneas del panel NCI-60 , que se utilizan rutinariamente para estudios de detección de fármacos. [31] [32] Los principales repositorios de líneas celulares, incluida la Colección Americana de Cultivos Tipo (ATCC), la Colección Europea de Cultivos Celulares (ECACC) y la Colección Alemana de Microorganismos y Cultivos Celulares (DSMZ), han recibido presentaciones de líneas celulares de investigadores que fueron identificadas erróneamente por ellos. [31] [33] Dicha contaminación plantea un problema para la calidad de la investigación producida utilizando líneas de cultivo celular, y los principales repositorios ahora están autentificando todas las presentaciones de líneas celulares. [34] La ATCC utiliza la huella de ADN de repetición en tándem corta (STR) para autentificar sus líneas celulares. [35]

Para abordar este problema de contaminación cruzada de líneas celulares, se anima a los investigadores a autenticar sus líneas celulares en un pasaje temprano para establecer la identidad de la línea celular. La autenticación debe repetirse antes de congelar las reservas de líneas celulares, cada dos meses durante el cultivo activo y antes de cualquier publicación de datos de investigación generados utilizando las líneas celulares. Se utilizan muchos métodos para identificar líneas celulares, incluido el análisis de isoenzimas , la tipificación del antígeno linfocítico humano (HLA), el análisis cromosómico, el cariotipo, la morfología y el análisis de STR . [35]

Un importante contaminante cruzado entre líneas celulares es la línea celular inmortal HeLa . La contaminación HeLa se observó por primera vez a principios de los años 60 en un cultivo no humano en los EE. UU. La contaminación intraespecie se descubrió en diecinueve líneas celulares en los años setenta. En 1974, se descubrió que cinco líneas celulares humanas de la Unión Soviética eran HeLa. Un estudio de seguimiento que analizó aproximadamente 50 líneas celulares indicó que la mitad tenía marcadores HeLa, pero el HeLa contaminante se había hibridado con las líneas celulares originales. Se ha informado de contaminación de células HeLa a partir de gotitas de aire . Jonas Salk incluso inyectó HeLa sin que nadie lo supiera en sujetos humanos en un ensayo de vacunas en 1978. [36]

Otros problemas técnicos

Como las células generalmente continúan dividiéndose en un cultivo, generalmente crecen hasta llenar el área o volumen disponible. Esto puede generar varios problemas:

La elección del medio de cultivo puede afectar la relevancia fisiológica de los hallazgos de los experimentos de cultivo celular debido a las diferencias en la composición y las concentraciones de nutrientes. [38] Recientemente se demostró un sesgo sistemático en los conjuntos de datos generados para las pruebas de silenciamiento de genes mediante CRISPR y ARNi , [39] y para el perfil metabólico de líneas celulares cancerosas . [38] El uso de un medio de crecimiento que represente mejor los niveles fisiológicos de nutrientes puede mejorar la relevancia fisiológica de los estudios in vitro y recientemente se desarrollaron tipos de medios como Plasmax [40] y Human Plasma Like Medium (HPLM), [41] .

Manipulación de células cultivadas

Entre las manipulaciones comunes que se llevan a cabo en las células de cultivo se encuentran los cambios de medios, el paso de células y la transfección de células. Estas se realizan generalmente utilizando métodos de cultivo de tejidos que se basan en una técnica aséptica . La técnica aséptica tiene como objetivo evitar la contaminación con bacterias, levaduras u otras líneas celulares. Las manipulaciones se llevan a cabo normalmente en una cabina de bioseguridad o una cabina de flujo laminar para excluir microorganismos contaminantes. También se pueden añadir antibióticos (por ejemplo, penicilina y estreptomicina ) y antimicóticos (por ejemplo, anfotericina B y solución antibiótica-antimicótica ) a los medios de crecimiento.

A medida que las células realizan procesos metabólicos, se produce ácido y el pH disminuye. A menudo, se agrega un indicador de pH al medio para medir el agotamiento de nutrientes.

Cambios en los medios

En el caso de cultivos adherentes, el medio puede eliminarse directamente mediante aspiración y luego reemplazarse. Los cambios de medio en cultivos no adherentes implican centrifugar el cultivo y resuspender las células en medio fresco.

Células que pasan

El paso (también conocido como subcultivo o división de células) implica transferir una pequeña cantidad de células a un nuevo recipiente. Las células se pueden cultivar durante más tiempo si se dividen regularmente, ya que evita la senescencia asociada con la alta densidad celular prolongada. Los cultivos en suspensión se pasan fácilmente con una pequeña cantidad de cultivo que contenga unas pocas células diluidas en un volumen mayor de medio fresco. Para los cultivos adherentes, primero se deben separar las células; esto se hace comúnmente con una mezcla de tripsina - EDTA ; sin embargo, ahora hay otras mezclas de enzimas disponibles para este propósito. Luego, se puede usar una pequeña cantidad de células separadas para sembrar un nuevo cultivo. Algunos cultivos celulares, como las células RAW, se raspan mecánicamente de la superficie de su recipiente con raspadores de goma.

Transfección y transducción

Otro método común para manipular células implica la introducción de ADN extraño mediante transfección . Esto se realiza a menudo para hacer que las células expresen un gen de interés. Más recientemente, la transfección de construcciones de ARNi se ha realizado como un mecanismo conveniente para suprimir la expresión de un gen o proteína en particular. El ADN también se puede insertar en células utilizando virus, en métodos conocidos como transducción , infección o transformación . Los virus, como agentes parásitos, son muy adecuados para introducir ADN en las células, ya que esto es parte de su proceso normal de reproducción.

Líneas celulares humanas establecidas

Las células HeLa cultivadas se han teñido con Hoechst , lo que hace que sus núcleos se vuelvan azules, y son una de las primeras líneas celulares humanas descendientes de Henrietta Lacks , quien murió de cáncer de cuello uterino, del cual se originaron estas células.

Las líneas celulares que se originan en seres humanos han sido algo controvertidas en bioética , ya que pueden sobrevivir a su organismo original y luego ser utilizadas en el descubrimiento de tratamientos médicos lucrativos. En la decisión pionera en esta área, la Corte Suprema de California sostuvo en Moore v. Regents of the University of California que los pacientes humanos no tienen derechos de propiedad sobre las líneas celulares derivadas de órganos extraídos con su consentimiento. [42]

Es posible fusionar células normales con una línea celular inmortalizada . Este método se utiliza para producir anticuerpos monoclonales . En resumen, los linfocitos aislados del bazo (o posiblemente de la sangre) de un animal inmunizado se combinan con una línea celular de mieloma inmortal (linaje de células B) para producir un hibridoma que tiene la especificidad de anticuerpos del linfocito primario y la inmortalidad del mieloma. Se utiliza un medio de crecimiento selectivo (HA o HAT) para seleccionar células de mieloma no fusionadas; los linfocitos primarios mueren rápidamente en cultivo y solo sobreviven las células fusionadas. Estas se examinan para la producción del anticuerpo requerido, generalmente en grupos para comenzar y luego después de la clonación simple.

Cepas celulares

Una cepa celular se deriva de un cultivo primario o de una línea celular mediante la selección o clonación de células que tienen propiedades o características específicas que deben definirse. Las cepas celulares son células que se han adaptado al cultivo pero, a diferencia de las líneas celulares, tienen un potencial de división finito. Las células no inmortalizadas dejan de dividirse después de 40 a 60 duplicaciones de población [43] y, después de esto, pierden su capacidad de proliferar (un evento determinado genéticamente conocido como senescencia). [44]

Aplicaciones del cultivo celular

El cultivo masivo de líneas celulares animales es fundamental para la fabricación de vacunas virales y otros productos de la biotecnología. El cultivo de células madre humanas se utiliza para ampliar el número de células y diferenciarlas en diversos tipos de células somáticas para trasplantes. [45] El cultivo de células madre también se utiliza para recolectar las moléculas y los exosomas que liberan las células madre con fines de desarrollo terapéutico. [46]

Los productos biológicos producidos mediante la tecnología del ADN recombinante (ADNr) en cultivos de células animales incluyen enzimas , hormonas sintéticas , inmunobiológicos ( anticuerpos monoclonales , interleucinas , linfocinas ) y agentes anticancerígenos . Aunque se pueden producir muchas proteínas más simples utilizando ADNr en cultivos bacterianos, actualmente se deben producir proteínas más complejas que están glicosiladas (modificadas con carbohidratos) en células animales. Un ejemplo importante de una proteína tan compleja es la hormona eritropoyetina . El costo de cultivar cultivos de células de mamíferos es alto, por lo que se están realizando investigaciones para producir tales proteínas complejas en células de insectos o en plantas superiores, el uso de células embrionarias individuales y embriones somáticos como fuente para la transferencia directa de genes mediante bombardeo de partículas, expresión de genes de tránsito y observación con microscopía confocal es una de sus aplicaciones. También ofrece confirmar el origen de células individuales de embriones somáticos y la asimetría de la primera división celular, que inicia el proceso.

El cultivo celular es también una técnica clave para la agricultura celular , cuyo objetivo es proporcionar tanto nuevos productos como nuevas formas de producir productos agrícolas existentes como leche, carne (cultivada) , fragancias y cuerno de rinoceronte a partir de células y microorganismos. Por lo tanto, se considera un medio para lograr una agricultura sin animales . También es una herramienta central para la enseñanza de la biología celular. [47]

Cultivo celular en dos dimensiones

La investigación en ingeniería de tejidos , células madre y biología molecular implica principalmente cultivos de células en placas de plástico planas. Esta técnica se conoce como cultivo celular bidimensional (2D) y fue desarrollada por primera vez por Wilhelm Roux , quien, en 1885, extrajo una porción de la placa medular de un pollo embrionario y la mantuvo en solución salina tibia durante varios días en una placa de vidrio plana. A partir del avance de la tecnología de polímeros surgió la placa de plástico estándar actual para el cultivo celular 2D, comúnmente conocida como placa de Petri . A Julius Richard Petri , un bacteriólogo alemán , generalmente se le atribuye esta invención mientras trabajaba como asistente de Robert Koch . Varios investigadores hoy también utilizan matraces de laboratorio de cultivo , cónicos e incluso bolsas desechables como las que se usan en los biorreactores de un solo uso .

Además de las placas de Petri, los científicos llevan mucho tiempo cultivando células en matrices derivadas de fuentes biológicas, como el colágeno o la fibrina, y, más recientemente, en hidrogeles sintéticos, como la poliacrilamida o el PEG. Lo hacen para obtener fenotipos que no se expresan en sustratos convencionalmente rígidos. Existe un creciente interés en controlar la rigidez de la matriz, [48] un concepto que ha dado lugar a descubrimientos en campos como:

  • Autorrenovación de células madre [49] [50]
  • Especificación de linaje [51]
  • Fenotipo de células cancerosas [52] [53] [54]
  • Fibrosis [55] [56]
  • Función de los hepatocitos [57] [58] [59]
  • Mecanodetección [60] [61] [62]

Cultivo celular en tres dimensiones

El cultivo celular en tres dimensiones se ha promocionado como "la nueva dimensión de la biología". [63] En la actualidad, la práctica del cultivo celular sigue basándose en combinaciones variables de estructuras celulares individuales o múltiples en 2D. [64] Actualmente, existe un aumento en el uso de cultivos celulares 3D en áreas de investigación que incluyen el descubrimiento de fármacos , la biología del cáncer, la medicina regenerativa , la evaluación de nanomateriales y la investigación básica en ciencias de la vida . [65] [66] [67] Los cultivos celulares 3D se pueden cultivar utilizando un andamio o matriz, o de una manera sin andamio. Los cultivos basados ​​en andamios utilizan una matriz 3D acelular o una matriz líquida. Los métodos sin andamios normalmente se generan en suspensiones. [68] Existe una variedad de plataformas utilizadas para facilitar el crecimiento de estructuras celulares tridimensionales, incluyendo sistemas de andamiaje como matrices de hidrogel [69] y andamiajes sólidos, y sistemas sin andamiaje como placas de baja adhesión, levitación magnética facilitada por nanopartículas , [70] placas de gotas colgantes, [71] [72] y cultivo celular rotatorio. Cultivar células en 3D conduce a una amplia variación en las firmas de expresión genética y en parte imita los tejidos en los estados fisiológicos. [73] Un modelo de cultivo celular 3D mostró un crecimiento celular similar al in vivo que un cultivo en monocapa, y los tres cultivos fueron capaces de sostener el crecimiento celular. [74] A medida que se ha desarrollado el cultivo 3D, resulta que tiene un gran potencial para diseñar modelos de tumores e investigar la transformación maligna y la metástasis, los cultivos 3D pueden proporcionar una herramienta adicional para comprender los cambios, las interacciones y la señalización celular. [75]

Cultivo de células en 3D en andamios

Eric Simon, en un informe de subvención del NIH SBIR de 1988, demostró que el electrohilado podía utilizarse para producir estructuras fibrosas de poliestireno y policarbonato a escala nanométrica y submicrométrica específicamente diseñadas para su uso como sustratos celulares in vitro . Este uso temprano de redes fibrosas electrohiladas para el cultivo celular y la ingeniería de tejidos demostró que varios tipos de células, incluidos los fibroblastos del prepucio humano (HFF), el carcinoma humano transformado (HEp-2) y el epitelio pulmonar de visón (MLE), se adherirían y proliferarían sobre las fibras de policarbonato. Se observó que, a diferencia de la morfología aplanada que se observa típicamente en el cultivo 2D, las células cultivadas en las fibras electrohiladas exhibían una morfología tridimensional redondeada más histotípica que se observa generalmente in vivo . [17]

Cultivo de células 3D en hidrogeles

Como la matriz extracelular natural (ECM) es importante para la supervivencia, proliferación, diferenciación y migración de las células, se consideran posibles enfoques para el cultivo celular in vivo diferentes matrices de cultivo de hidrogel que imitan la estructura de la ECM natural. [76] Los hidrogeles están compuestos de poros interconectados con alta retención de agua, lo que permite un transporte eficiente de sustancias como nutrientes y gases. Hay varios tipos diferentes de hidrogeles de materiales naturales y sintéticos disponibles para el cultivo celular en 3D, incluidos hidrogeles de extracto de ECM animal, hidrogeles de proteínas, hidrogeles de péptidos, hidrogeles de polímeros e hidrogeles de nanocelulosa a base de madera .

Cultivo de células en 3D mediante levitación magnética

El método de cultivo de células en 3D mediante levitación magnética (MLM) consiste en la aplicación del cultivo de tejido en 3D mediante la inducción de células tratadas con conjuntos de nanopartículas magnéticas en campos magnéticos que varían espacialmente utilizando impulsores magnéticos de neodimio y promoviendo interacciones entre células mediante la levitación de las células hasta la interfaz aire/líquido de una placa de Petri estándar. Los conjuntos de nanopartículas magnéticas consisten en nanopartículas magnéticas de óxido de hierro, nanopartículas de oro y el polímero polilisina. El cultivo de células en 3D es escalable, con la capacidad de cultivar de 500 células a millones de células o desde una sola placa hasta sistemas de bajo volumen de alto rendimiento.

Cultivo e ingeniería de tejidos

El cultivo celular es un componente fundamental del cultivo de tejidos y de la ingeniería de tejidos , ya que establece los principios básicos del crecimiento y el mantenimiento de células in vitro . La principal aplicación del cultivo de células humanas es en la industria de las células madre, donde las células madre mesenquimales se pueden cultivar y criopreservar para su uso futuro. La ingeniería de tejidos ofrece potencialmente mejoras espectaculares en la atención médica de bajo costo para cientos de miles de pacientes al año.

Vacunas

Actualmente, las vacunas contra la polio , el sarampión , las paperas , la rubéola y la varicela se elaboran en cultivos celulares. Debido a la amenaza de pandemia del virus H5N1 , el gobierno de los Estados Unidos está financiando investigaciones sobre el uso de cultivos celulares para vacunas contra la gripe . Entre las ideas novedosas en este campo se incluyen las vacunas basadas en ADN recombinante , como una elaborada utilizando adenovirus humano (un virus del resfriado común) como vector, [77] [78] y nuevos adyuvantes. [79]

Cocultivo celular

La técnica de co-cultivo se utiliza para estudiar la comunicación celular entre dos o más tipos de células en una placa o en una matriz 3D. El cultivo de diferentes células madre y la interacción de las células inmunes se pueden investigar en un modelo in vitro similar al tejido biológico. Dado que la mayoría de los tejidos contienen más de un tipo de célula, es importante evaluar su interacción en un entorno de cultivo 3D para obtener una mejor comprensión de su interacción e introducir tejidos miméticos. Hay dos tipos de co-cultivo: directo e indirecto. Mientras que la interacción directa implica que las células estén en contacto directo entre sí en el mismo medio de cultivo o matriz, la interacción indirecta implica diferentes entornos, lo que permite que participen la señalización y los factores solubles. [15] [80]

La diferenciación celular en modelos de tejido durante la interacción entre células se puede estudiar utilizando el sistema de cocultivo para simular tumores cancerosos, evaluar el efecto de los medicamentos en ensayos terapéuticos y estudiar el efecto de los medicamentos en ensayos terapéuticos. El sistema de cocultivo en modelos 3D puede predecir la respuesta a la quimioterapia y la terapia endocrina si el microambiente define el tejido biológico para las células.

En la ingeniería de tejidos se utiliza un método de cocultivo para generar la formación de tejido con múltiples células que interactúan directamente. [81]

Representación esquemática de cultivo 2D, cultivo 3D, órgano en chip y estudio in vivo

Cultivo celular en dispositivo microfluídico

La técnica de microfluidos consiste en sistemas desarrollados que pueden realizar un proceso en un flujo que normalmente se encuentra en una escala de micrones. Los chips de microfluidos también se conocen como laboratorios en un chip y son capaces de tener pasos de reacción y procedimientos continuos con una cantidad de reactivos y espacio de sobra. Estos sistemas permiten la identificación y el aislamiento de células y moléculas individuales cuando se combinan con ensayos biológicos apropiados y técnicas de detección de alta sensibilidad. [82] [83]

Órgano en un chip

Los sistemas OoC imitan y controlan el microambiente de las células mediante el cultivo de tejidos en microfluidos. Combinando la ingeniería de tejidos, la fabricación de biomateriales y la biología celular, ofrece la posibilidad de establecer un modelo biomimético para estudiar enfermedades humanas en el laboratorio. En los últimos años, la ciencia del cultivo celular en 3D ha logrado un progreso significativo, lo que ha llevado al desarrollo de OoC. OoC se considera un paso preclínico que beneficia los estudios farmacéuticos, el desarrollo de fármacos y el modelado de enfermedades. [84] [85] OoC es una tecnología importante que puede cerrar la brecha entre las pruebas con animales y los estudios clínicos y también, por los avances que la ciencia ha logrado, podría ser un reemplazo para los estudios in vivo para la administración de fármacos y los estudios fisiopatológicos. [86]

Cultivo de células no mamíferas

Además del cultivo de líneas celulares inmortalizadas bien establecidas, las células de explantos primarios de una plétora de organismos pueden cultivarse durante un período de tiempo limitado antes de que se produzca la senescencia (véase el límite de Hayflick). Las células primarias cultivadas se han utilizado ampliamente en la investigación, como es el caso de los queratocitos de peces en estudios de migración celular. [87] [47] [88]

Métodos de cultivo de células vegetales

Los cultivos de células vegetales se cultivan normalmente como cultivos de suspensión celular en un medio líquido o como cultivos de callos en un medio sólido. El cultivo de células vegetales indiferenciadas y callos requiere un equilibrio adecuado de las hormonas de crecimiento vegetal auxina y citoquinina . [ cita requerida ]

Cultivo de células de insectos

Las células derivadas de Drosophila melanogaster (principalmente, las células Schneider 2 ) se pueden utilizar para experimentos que pueden ser difíciles de realizar en moscas vivas o larvas, como estudios bioquímicos o estudios que utilizan ARNi . Las líneas celulares derivadas del gusano soldado Spodoptera frugiperda , incluidas Sf9 y Sf21 , y de la oruga de la col Trichoplusia ni , las células High Five , se utilizan comúnmente para la expresión de proteínas recombinantes utilizando baculovirus . [89]

Métodos de cultivo de bacterias y levaduras.

En el caso de las bacterias y las levaduras, generalmente se cultivan pequeñas cantidades de células en un soporte sólido que contiene nutrientes incorporados, normalmente un gel como el agar, mientras que los cultivos a gran escala se cultivan con las células suspendidas en un caldo nutritivo. [ cita requerida ]

Métodos de cultivo viral

El cultivo de virus requiere el cultivo de células de origen mamífero, vegetal, fúngico o bacteriano como hospedadores para el crecimiento y replicación del virus. Se pueden generar virus de tipo salvaje completos, virus recombinantes o productos virales en tipos de células distintos de sus hospedadores naturales bajo las condiciones adecuadas. Dependiendo de la especie del virus, la infección y la replicación viral pueden resultar en la lisis de la célula hospedadora y la formación de una placa viral . [ cita requerida ]

Líneas celulares comunes

Líneas celulares humanas
Líneas celulares animales
Líneas celulares de ratón
Líneas de células tumorales de rata
Líneas celulares vegetales
Otras líneas celulares de especies

Lista de líneas celulares

Línea celularSignificadoOrganismoTejido de origenMorfologíaCampo de golf
3T3-L1"Transferencia de 3 días, inóculo 3 x 10^5 células"RatónEmbriónFibroblastCelosaurio de la CEACC
4T1RatónGlándula mamariaCellosaurio de la ATCC
1321N1HumanoCerebroAstrocitomaCelosaurio de la CEACC
9 litrosRataCerebroGlioblastomaCelosaurio de la CEACC
A172HumanoCerebroGlioblastomaCelosaurio de la CEACC
A20RatónLinfoma BLinfocito BCellosaurio
A253HumanoConducto submandibularCarcinoma de cabeza y cuelloCellosaurio de la ATCC
A2780HumanoOvarioCarcinoma de ovarioCelosaurio de la CEACC
A2780ADRHumanoOvarioDerivado resistente a la adriamicina del A2780Celosaurio de la CEACC
A2780cisHumanoOvarioDerivado resistente al cisplatino de A2780Celosaurio de la CEACC
A431HumanoEpitelio de la pielCarcinoma de células escamosasCelosaurio de la CEACC
A549HumanoPulmónCarcinoma de pulmónCelosaurio de la CEACC
AB9Pez cebraAletaFibroblastCellosaurio de la ATCC
AHL-1Pulmón de hámster armenio-1HámsterPulmónECACC Archivado el 24 de noviembre de 2021 en Wayback Machine Cellosaurus
ALCRatónMédula óseaEstromaPMID  2435412 [90] Celosaurio
B16RatónMelanomaECACC Archivado el 24 de noviembre de 2021 en Wayback Machine Cellosaurus
B35RataNeuroblastomaCellosaurio de la ATCC
BCP-1HumanoPBMCLinfoma de derrame primario VIH+Cellosaurio de la ATCC
BEAS-2BEpitelio bronquial + híbrido del virus Adenovirus 12-SV40 (Ad12SV40)HumanoPulmónEpitelialCelosaurio de la CEACC
bFin.3Endotelio cerebral 3RatónCerebro/ corteza cerebralEndotelioCellosaurio
BHK-21Riñón de hámster bebé - 21HámsterRiñónFibroblastECACC Archivado el 24 de noviembre de 2021 en Wayback Machine Cellosaurus
BOSC23Línea celular de empaquetamiento derivada de HEK 293HumanoRiñón (embrionario)EpitelioCellosaurio
BT-20Tumor de mama-20HumanoEpitelio mamarioCarcinoma de mamaCellosaurio de la ATCC
BxPC-3Xenoinjerto de biopsia de carcinoma pancreático línea 3HumanoAdenocarcinoma de páncreasEpitelialCelosaurio de la CEACC
C2C12RatónMioblastoCelosaurio de la CEACC
C3H-10T1/2RatónLínea de células mesenquimales embrionariasCelosaurio de la CEACC
C6RataAstrocito cerebralGliomaCelosaurio de la CEACC
C6/36Insecto - Mosquito tigre asiáticoTejido larvarioCelosaurio de la CEACC
Caco-2HumanoColonCarcinoma colorrectalCelosaurio de la CEACC
Cal-27HumanoLenguaCarcinoma de células escamosasCellosaurio de la ATCC
Calu-3HumanoPulmónAdenocarcinomaCellosaurio de la ATCC
CGR8RatónCélulas madre embrionariasCelosaurio de la CEACC
ChorroOvario de hámster chinoHámsterOvarioEpitelioECACC Archivado el 29 de octubre de 2021 en Wayback Machine Cellosaurus
LMC T1Linfocito T 1 de leucemia mieloide crónicaHumanoFase aguda de la LMCLeucemia de células TCellosaurio del DSMZ
CMT12Tumor mamario canino 12PerroGlándula mamariaEpitelioCellosaurio
COR-L23HumanoPulmónCarcinoma de pulmónCelosaurio de la CEACC
COR-L23/5010HumanoPulmónCarcinoma de pulmónCelosaurio de la CEACC
COR-L23/RCPHumanoPulmónCarcinoma de pulmónCelosaurio de la CEACC
COR-L23/R23-HumanoPulmónCarcinoma de pulmónCelosaurio de la CEACC
COS-7Cercopithecus aethiops , SV-40 de origen defectuosoMono del Viejo Mundo - Cercopithecus aethiops ( Chlorocebus )RiñónFibroblastCelosaurio de la CEACC
COVID-434HumanoOvarioCarcinoma de células de la granulosa del ovarioPMID  8436435 [91] Celosaurio de la ECACC
CT26RatónColonCarcinoma colorrectalCellosaurio
D17PerroMetástasis pulmonarOsteosarcomaCellosaurio de la ATCC
Día de los muertosHumanoCerebroMeduloblastomaCellosaurio de la ATCC
DH82PerroHistiocitosisMonocitos / macrófagosCelosaurio de la CEACC
DU145HumanoCarcinoma de próstata insensible a los andrógenosCellosaurio de la ATCC
DuCapCáncer de duramadre de la próstataHumanoCarcinoma de próstata metastásicoEpitelialPMID  11317521 [92] Celosaurio
E14Tg2aRatónCélulas madre embrionariasCelosaurio de la CEACC
EL4RatónLeucemia de células TCelosaurio de la CEACC
EM-2HumanoCrisis de la explosión de la LMCLínea LMC Ph+Cellosaurio del DSMZ
EM-3HumanoCrisis de la explosión de la LMCLínea LMC Ph+Cellosaurio del DSMZ
EMT6/AR1RatónGlándula mamariaDe tipo epitelialCelosaurio de la CEACC
EMT6/AR10.0RatónGlándula mamariaDe tipo epitelialCelosaurio de la CEACC
FM3HumanoMetástasis de ganglios linfáticosMelanomaCelosaurio de la CEACC
GL261Glioma 261RatónCerebroGliomaCellosaurio
H1299HumanoPulmónCarcinoma de pulmónCellosaurio de la ATCC
HaCaTHumanoPielQueratinocitoCLS Cellosaurio
HCA2HumanoColonAdenocarcinomaCelosaurio de la CEACC
Corona británica 293Riñón embrionario humano 293HumanoRiñón (embrionario)EpitelioCelosaurio de la CEACC
HEK293TDerivado de HEK 293HumanoRiñón (embrionario)EpitelioCelosaurio de la CEACC
HeLa"A Henrietta le falta"HumanoEpitelio del cuello uterinoCarcinoma de cuello uterinoCelosaurio de la CEACC
Hepa1c1c7Clon 7 de la línea 1 del hepatoma del clon 1RatónHepatomaEpitelialCelosaurio de la CEACC
Hepatitis G2HumanoHígadoHepatoblastomaCelosaurio de la CEACC
Choca esos cincoInsecto (polilla) - Trichoplusia niOvarioCellosaurio
HL-60Leucemia humana-60HumanoSangreMieloblastoCelosaurio de la CEACC
HT-1080HumanoFibrosarcomaCelosaurio de la CEACC
HT-29HumanoEpitelio del colonAdenocarcinomaCelosaurio de la CEACC
J558LRatónMielomaCélula linfocito BCelosaurio de la CEACC
JurkatHumanoGlóbulos blancosLeucemia de células TCelosaurio de la CEACC
Y.Y.HumanoLinfoblastoideCélula B transformada por EBVCelosaurio de la CEACC
K562HumanoLinfoblastoideCrisis de la explosión de la LMCCelosaurio de la CEACC
KBM-7HumanoLinfoblastoideCrisis de la explosión de la LMCCellosaurio
KCL-22HumanoLinfoblastoideLMCCellosaurio del DSMZ
KG1HumanoLinfoblastoideLesión cerebral leve (LMA)Celosaurio de la CEACC
Ku812HumanoLinfoblastoideEritroleucemiaCelosaurio de la CEACC
KYO-1Kioto-1HumanoLinfoblastoideLMCCellosaurio del DSMZ
L1210RatónLeucemia linfocíticaLíquido ascíticoCelosaurio de la CEACC
L243RatónHibridomaSecreta mAb L243 (contra HLA-DR)Cellosaurio de la ATCC
LNCaPCáncer de ganglio linfático de la próstataHumanoAdenocarcinoma de próstataEpitelialCelosaurio de la CEACC
MA-104Asociados microbiológicos-104Mono verde africanoRiñónEpitelialCellosaurio
MA2.1RatónHibridomaSecreta mAb MA2.1 (contra HLA-A2 y HLA-B17)Cellosaurio de la ATCC
Ma-Mel 1, 2, 3....48HumanoPielUna gama de líneas celulares de melanomaECACC Archivado el 24 de noviembre de 2021 en Wayback Machine Cellosaurus
MC-38Colon-38 del ratónRatónColonAdenocarcinomaCellosaurio
MCF-7Fundación contra el cáncer de Michigan-7HumanoMamaCarcinoma ductal invasivo de mama ER+, PR+Celosaurio de la CEACC
MCF-10AFundación contra el cáncer de Michigan-10AHumanoEpitelio mamarioCellosaurio de la ATCC
MDA-MB-157MD Anderson - Cáncer de mama metastásico - 157HumanoMetástasis de derrame pleuralCarcinoma de mamaCelosaurio de la CEACC
MDA-MB-231MD Anderson - Cáncer de mama metastásico - 231HumanoMetástasis de derrame pleuralCarcinoma de mamaCelosaurio de la CEACC
MDA-MB-361MD Anderson - Cáncer de mama metastásico - 361HumanoMelanoma (contaminado por M14)Celosaurio de la CEACC
MDA-MB-468MD Anderson - Cáncer de mama metastásico - 468HumanoMetástasis de derrame pleuralCarcinoma de mamaCellosaurio de la ATCC
MDCK IIRiñón canino Madin Darby IIPerroRiñónEpitelioCelosaurio de la CEACC
MG63HumanoHuesoOsteosarcomaCelosaurio de la CEACC
PaCa-2 desaparecidoHumanoPróstataCarcinoma de páncreasCellosaurio de la ATCC
Morfología/0,2RHumanoPulmónCarcinoma de pulmónCelosaurio de la CEACC
Mono-Mac-6HumanoGlóbulos blancosLeucemia mieloide aguda metaplásicaCellosaurio del DSMZ
MRC-5Cepa celular 5 del Consejo de Investigación MédicaHumanoPulmón (fetal)FibroblastECACC Archivado el 24 de noviembre de 2021 en Wayback Machine Cellosaurus
MTD-1ARatónEpitelioCellosaurio
Mi finEndotelio miocárdicoRatónEndotelioCellosaurio
NCI-H69HumanoPulmónCarcinoma de pulmónCelosaurio de la CEACC
NCI-H69/RCPHumanoPulmónCarcinoma de pulmónCelosaurio de la CEACC
NCI-H69/LX10HumanoPulmónCarcinoma de pulmónCelosaurio de la CEACC
NCI-H69/LX20HumanoPulmónCarcinoma de pulmónCelosaurio de la CEACC
NCI-H69/LX4HumanoPulmónCarcinoma de pulmónCelosaurio de la CEACC
Neuro-2aRatónNervio/ neuroblastomaCélulas madre neuronalesCelosaurio de la CEACC
NIH-3T3NIH , transferencia de 3 días, inóculo 3 x 10 5 célulasRatónEmbriónFibroblastCelosaurio de la CEACC
NALM-1HumanoSangre periféricaLMC por crisis explosivaCellosaurio de la ATCC
NK-92HumanoLeucemia/linfomaCellosaurio de la ATCC
NTERA-2HumanoMetástasis pulmonarCarcinoma embrionarioCelosaurio de la CEACC
NO-145HumanoPielMelanomaESTDAB Archivado el 16 de noviembre de 2011 en Wayback Machine Cellosaurus
DE ACUERDORiñón de zarigüeyaZarigüeya de Virginia - Didelphis virginianaRiñónCelosaurio de la CEACC
Líneas celulares OPCN/OPCTHumanoPróstataGama de líneas tumorales de próstataCellosaurio
P3X63Ag8RatónMielomaCelosaurio de la CEACC
PANC-1HumanoConductoCarcinoma epitelioideCellosaurio de la ATCC
PC12RataMédula suprarrenalFeocromocitomaCelosaurio de la CEACC
PC-3Cáncer de próstata-3HumanoMetástasis óseaCarcinoma de próstataCelosaurio de la CEACC
ParHumanoLeucemia de células TCellosaurio del DSMZ
PNT1AHumanoPróstataLínea tumoral transformada por SV40Celosaurio de la CEACC
PNT2HumanoPróstataLínea tumoral transformada por SV40Celosaurio de la CEACC
Parte K2La segunda línea celular derivada de Potorous tridactylisPotoroo de nariz larga - Potorous tridactylusRiñónEpitelialCelosaurio de la CEACC
RajiHumanoLinfoma BSimilar a linfoblastosCelosaurio de la CEACC
RBL-1Leucemia basófila de rata tipo 1RataLeucemiaCélula basófilaCelosaurio de la CEACC
Ren CaCarcinoma renalRatónRiñónCarcinoma renalCellosaurio de la ATCC
RIN-5FRatónPáncreasCelosaurio de la CEACC
RMA-SRatónTumor de células TCellosaurio
S2Schneider 2Insecto - Drosophila melanogasterEmbriones en etapa avanzada (20 a 24 horas de edad)Cellosaurio de la ATCC
SaOS-2Sarcoma osteogénico-2HumanoHuesoOsteosarcomaCelosaurio de la CEACC
SF21Spodoptera frugiperda21Insecto (polilla) - Spodoptera frugiperdaOvarioCelosaurio de la CEACC
SF9Spodoptera frugiperda 9Insecto (polilla) - Spodoptera frugiperdaOvarioCelosaurio de la CEACC
SH-SY5YHumanoMetástasis de médula óseaNeuroblastomaCelosaurio de la CEACC
Si HaHumanoEpitelio del cuello uterinoCarcinoma de cuello uterinoCellosaurio de la ATCC
SK-BR-3Cáncer de mama Sloan-Kettering 3HumanoMamaCarcinoma de mamaCellosaurio del DSMZ
SK-OV-3Cáncer de ovario Sloan-Kettering 3HumanoOvarioCarcinoma de ovarioCelosaurio de la CEACC
SK-N-SHHumanoCerebroEpitelialCellosaurio de la ATCC
T2HumanoLeucemia de células T/ hibridoma de línea de células BCellosaurio de la ATCC
T-47DHumanoMamaCarcinoma ductal de mamaCelosaurio de la CEACC
T84HumanoMetástasis pulmonarCarcinoma colorrectalCelosaurio de la CEACC
T98GHumanoGlioblastoma-astrocitomaEpitelioCelosaurio de la CEACC
THP-1HumanoMonocitoLeucemia monocítica agudaCelosaurio de la CEACC
U2OSHumanoOsteosarcomaEpitelialCelosaurio de la CEACC
U373HumanoGlioblastoma-astrocitomaEpitelioECACC Archivado el 24 de noviembre de 2021 en Wayback Machine Cellosaurus
U87HumanoGlioblastoma-astrocitomaDe tipo epitelialCelosaurio de la CEACC
U937HumanoLinfoma monocítico leucémicoCelosaurio de la CEACC
VCapCáncer vertebral de próstataHumanoMetástasis vertebralCarcinoma de próstataCelosaurio de la CEACC
VeroDel esperanto: verda (verde, para mono verde) reno (riñón)Mono verde africano - Chlorocebus sabaeusEpitelio renalCelosaurio de la CEACC
VG-1HumanoLinfoma de derrame primarioCellosaurio
WM39HumanoPielMelanomaCelosaurio de la ESTDAB
WT-49HumanoLinfoblastoideCelosaurio de la CEACC
Yac-1RatónLinfomaCelosaurio de la CEACC
AñoHumanoLinfoblastoideCélula B transformada por EBVInmunología humana [93] ECACC Cellosaurus

Véase también

Referencias y notas

  1. ^ ab Taylor MW (2014). "Una historia del cultivo celular". Virus y hombre: una historia de interacciones . Cham: Springer International Publishing. págs. 41–52. doi :10.1007/978-3-319-07758-1_3. ISBN 978-3-319-07757-4.
  2. ^ Harris AR, Peter L, Bellis J, Baum B, Kabla AJ, Charras GT (octubre de 2012). "Caracterización de la mecánica de monocapas de células cultivadas". Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 109 (41): 16449–16454. Bibcode :2012PNAS..10916449H. doi : 10.1073/pnas.1213301109 . PMC 3478631 . PMID  22991459. 
  3. ^ "Algunos hitos en el desarrollo del cultivo de tejidos y células" . Consultado el 19 de abril de 2006 .
  4. ^ "Cultivo celular" . Consultado el 19 de abril de 2006 .
  5. ^ "Whonamedit - La solución de Ringer". whonamedit.com . Consultado el 9 de junio de 2014 .
  6. ^ Steinhardt E, Israeli C, Lambert RA (1913). "Estudios sobre el cultivo del virus de la vaccinia". Revista de enfermedades infecciosas . 13 (2): 294–300. doi :10.1093/infdis/13.2.294. ISSN  0022-1899. JSTOR  30073371.
  7. ^ Atala A (2009). "Crecimiento de nuevos órganos". TEDMED . Consultado el 23 de agosto de 2021 .
  8. ^ "Animales y alternativas en la experimentación". Archivado desde el original el 25 de febrero de 2006. Consultado el 19 de abril de 2006 .
  9. ^ Fentem JH (febrero de 2006). "Trabajar juntos para responder a los desafíos de la política de la UE para reemplazar la experimentación con animales". Alternativas a los animales de laboratorio . 34 (1): 11–18. doi : 10.1177/026119290603400116 . PMID  16522146. S2CID  10339716.
  10. ^ Schiff JA (febrero de 2002). "Un héroe anónimo de la investigación médica". Revista de exalumnos de Yale . Archivado desde el original el 14 de noviembre de 2012. Consultado el 19 de abril de 2006 .
  11. ^ Bonner J (junio de 1936). "Cultivos de tejidos vegetales desde el punto de vista hormonal". Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 22 (6): 426–430. Bibcode :1936PNAS...22..426B. doi : 10.1073/pnas.22.6.426 . JSTOR  86579. PMC 1076796 . PMID  16588100. 
  12. ^ Haberlandt, G. (1902) Kulturversuche mit isolierten Pflanzenzellen. Sitzungsber. Akád. Wiss. Viena. Matemáticas.-Naturwiss. Kl., Abt. J. 111, 69–92.
  13. ^ Noé AC (octubre de 1934). "Gottlieb Haberlandt". Fisiología vegetal . 9 (4): 850–855. doi :10.1104/pp.9.4.850. PMC 439112 . PMID  16652925. 
  14. ^ Cultivo de tejidos vegetales. 100 años desde Gottlieb Haberlandt. Laimer, Margit; Rücker, Waltraud (Eds.) 2003. Springer ISBN 978-3-211-83839-6 
  15. ^ ab Carrel A, Burrows MT (marzo de 1911). "Cultivo de tejidos in vitro y técnica ITS". The Journal of Experimental Medicine . 13 (3): 387–396. doi :10.1084/jem.13.3.387. PMC 2125263 . PMID  19867420. 
  16. ^ Martin BM (1 de diciembre de 2013). Técnicas de cultivo de tejidos: una introducción. Springer Science & Business Media. págs. 29-30. ISBN 978-1-4612-0247-9.
  17. ^ ab Simon EM (1988). "Informe final de la fase I: sustratos fibrosos para cultivo celular (R3RR03544A)". ResearchGate . Consultado el 22 de mayo de 2017 .
  18. ^ Urry, LA, Campbell, NA, Cain, ML, Reece, JB, Wasserman, S. (2007). Biología. Reino Unido: Benjamin-Cummings Publishing Company. p. 860
  19. ^ Voigt N, Pearman CM, Dobrev D, Dibb KM (septiembre de 2015). "Métodos para aislar células auriculares de grandes mamíferos y humanos". Journal of Molecular and Cellular Cardiology . 86 : 187–198. doi : 10.1016/j.yjmcc.2015.07.006 . PMID  26186893.
  20. ^ Louch WE, Sheehan KA, Wolska BM (septiembre de 2011). "Métodos de aislamiento, cultivo y transferencia de genes de cardiomiocitos". Journal of Molecular and Cellular Cardiology . 51 (3): 288–298. doi :10.1016/j.yjmcc.2011.06.012. PMC 3164875 . PMID  21723873. 
  21. ^ Hemeda, H., Giebel, B., Wagner, W. (16 de febrero de 2014) Evaluación del lisado de plaquetas humanas frente al suero bovino fetal para el cultivo de células estromales mesenquimales Citoterapia p170-180 número 2 doi.10.1016
  22. ^ "Post - Blog | Boval BioSolutions, LLC". bovalco.com. Archivado desde el original el 10 de septiembre de 2014. Consultado el 2 de diciembre de 2014 .
  23. ^ "Solución de lipoproteína purificada LipiMAX a partir de suero bovino". Selborne Biological Services . 2006. Archivado desde el original el 19 de julio de 2012. Consultado el 2 de febrero de 2010 .
  24. ^ Portela VM, Zamberlam G, Price CA (abril de 2010). "La densidad de siembra de células altera la proporción de expresión génica de enzimas estrogénicas y progestágenas en células de la granulosa cultivadas". Fertilidad y esterilidad . 93 (6): 2050–2055. doi : 10.1016/j.fertnstert.2009.01.151 . PMID  19324349.
  25. ^ Jaccard N, Macown RJ, Super A, Griffin LD, Veraitch FS, Szita N (octubre de 2014). "Caracterización automatizada y en línea del crecimiento de cultivos celulares adherentes en un biorreactor microfabricado". Journal of Laboratory Automation . 19 (5): 437–443. doi :10.1177/2211068214529288. PMC 4230958 . PMID  24692228. 
  26. ^ Humpel C (octubre de 2015). "Cultivos organotípicos de cortes cerebrales: una revisión". Neurociencia . 305 : 86–98. doi :10.1016/j.neuroscience.2015.07.086. PMC 4699268 . PMID  26254240. 
  27. ^ Neimark J (febrero de 2015). "Línea de ataque". Science . 347 (6225): 938–940. Bibcode :2015Sci...347..938N. doi : 10.1126/science.347.6225.938 . PMID  25722392.
  28. ^ Drexler HG, Dirks WG, MacLeod RA (octubre de 1999). "Líneas celulares hematopoyéticas humanas falsas: contaminaciones cruzadas y malas interpretaciones". Leucemia . 13 (10): 1601–1607. doi : 10.1038/sj.leu.2401510 . PMID  10516762.
  29. ^ Drexler HG, MacLeod RA, Dirks WG (diciembre de 2001). "Contaminación cruzada: HS-Sultan no es un mieloma sino una línea celular de linfoma de Burkitt". Blood . 98 (12): 3495–3496. doi : 10.1182/blood.V98.12.3495 . PMID  11732505.
  30. ^ Cabrera CM, Cobo F, Nieto A, Cortés JL, Montes RM, Catalina P, Concha A (junio de 2006). "Pruebas de identidad: determinación de contaminación cruzada entre líneas celulares". Citotecnología . 51 (2): 45–50. doi :10.1007/s10616-006-9013-8. PMC 3449683 . PMID  19002894. 
  31. ^ ab Chatterjee R (febrero de 2007). "Biología celular. Casos de identidad equivocada". Science . 315 (5814): 928–931. doi :10.1126/science.315.5814.928. PMID  17303729. S2CID  13255156.
  32. ^ Liscovitch M, Ravid D (enero de 2007). "Un estudio de caso sobre la identificación errónea de líneas celulares cancerosas: las células MCF-7/AdrR (redesignadas NCI/ADR-RES) se derivan de células de carcinoma ovárico humano OVCAR-8". Cancer Letters . 245 (1–2): 350–352. doi :10.1016/j.canlet.2006.01.013. PMID  16504380.
  33. ^ MacLeod RA, Dirks WG, Matsuo Y, Kaufmann M, Milch H, Drexler HG (noviembre de 1999). "Contaminación cruzada intraespecie generalizada de líneas celulares tumorales humanas que surge en la fuente". Revista internacional del cáncer . 83 (4): 555–563. doi : 10.1002/(SICI)1097-0215(19991112)83:4<555::AID-IJC19>3.0.CO;2-2 . PMID  10508494.
  34. ^ Masters JR (abril de 2002). "Células HeLa 50 años después: lo bueno, lo malo y lo feo". Nature Reviews. Cáncer . 2 (4): 315–319. doi :10.1038/nrc775. PMID  12001993. S2CID  991019.
  35. ^ ab Dunham JH, Guthmiller P (2008). "Doing good science: Authenticating cell line identity" (PDF) . Cell Notes . 22 : 15–17. Archivado desde el original (PDF) el 28 de octubre de 2008 . Consultado el 28 de octubre de 2008 .
  36. ^ Brendan P. Lucey, Walter A. Nelson-Rees, Grover M. Hutchins; Henrietta Lacks, Células HeLa y contaminación de cultivos celulares. Arch Pathol Lab Med 1 de septiembre de 2009; 133 (9): 1463–1467. doi: https://doi.org/10.5858/133.9.1463
  37. ^ Nguyen HT, Geens M, Spits C (2012). "Inestabilidad genética y epigenética en células madre pluripotentes humanas". Actualización sobre reproducción humana . 19 (2): 187–205. doi : 10.1093/humupd/dms048 . PMID:  23223511.
  38. ^ ab Lagziel S, Gottlieb E, Shlomi T (diciembre de 2020). "Cuidado con los medios de comunicación". Nature Metabolism . 2 (12): 1369–1372. doi :10.1038/s42255-020-00299-y. PMID  33046912. S2CID  222319735.
  39. ^ Lagziel S, Lee WD, Shlomi T (abril de 2019). "Inferir dependencias del cáncer en genes metabólicos a partir de pruebas genéticas a gran escala". BMC Biology . 17 (1): 37. doi : 10.1186/s12915-019-0654-4 . PMC 6489231 . PMID  31039782. 
  40. ^ Vande Voorde J, Ackermann T, Pfetzer N, Sumpton D, Mackay G, Kalna G, et al. (enero de 2019). "Mejora de la fidelidad metabólica de los modelos de cáncer con un medio de cultivo celular fisiológico". Science Advances . 5 (1): eaau7314. Bibcode :2019SciA....5.7314V. doi :10.1126/sciadv.aau7314. PMC 6314821 . PMID  30613774. 
  41. ^ Cantor JR, Abu-Remaileh M, Kanarek N, Freinkman E, Gao X, Louissaint A, et al. (abril de 2017). "El medio fisiológico reconfigura el metabolismo celular y revela que el ácido úrico es un inhibidor endógeno de la sintetasa de UMP". Cell . 169 (2): 258–272.e17. doi :10.1016/j.cell.2017.03.023. PMC 5421364 . PMID  28388410. 
  42. ^ "Moore v. Regents of University of California (1990) 51 C3d 120". Online.ceb.com . Consultado el 27 de enero de 2012 .
  43. ^ Hayflick L (septiembre de 1998). "Una breve historia de la mortalidad e inmortalidad de las células cultivadas". The Keio Journal of Medicine . 3. 47 (3): 174–182. doi : 10.2302/kjm.47.174 . PMID  9785764.
  44. ^ "Guía de tejidos de Worthington" . Consultado el 30 de abril de 2013 .
  45. ^ Qian L, Saltzman WM (2004). "Mejora de la expansión y la diferenciación neuronal de células madre mesenquimales mediante la modificación de la superficie de cultivo". Biomateriales . 25 (7–8): 1331–1337. doi :10.1016/j.biomaterials.2003.08.013. PMID  14643607.
  46. ^ Maguire G (mayo de 2016). "Terapéutica a partir de células madre adultas y la curva de popularidad". ACS Medicinal Chemistry Letters . 7 (5): 441–443. doi :10.1021/acsmedchemlett.6b00125. PMC 4867479 . PMID  27190588. 
  47. ^ ab Prieto D, Aparicio G, Sotelo-Silveira JR (noviembre de 2017). "Análisis de la migración celular: un experimento de laboratorio de bajo costo para cursos de biología celular y del desarrollo utilizando queratocitos de escamas de peces". Educación en bioquímica y biología molecular . 45 (6): 475–482. doi : 10.1002/bmb.21071 . PMID:  28627731.
  48. ^ Discher DE, Janmey P, Wang YL (noviembre de 2005). "Las células tisulares sienten y responden a la rigidez de su sustrato". Science . 310 (5751): 1139–1143. Bibcode :2005Sci...310.1139D. CiteSeerX 10.1.1.318.690 . doi :10.1126/science.1116995. PMID  16293750. S2CID  9036803. 
  49. ^ Gilbert PM, Havenstrite KL, Magnusson KE, Sacco A, Leonardi NA, Kraft P, et al. (agosto de 2010). "La elasticidad del sustrato regula la autorrenovación de las células madre del músculo esquelético en cultivo". Science . 329 (5995): 1078–1081. Bibcode :2010Sci...329.1078G. doi :10.1126/science.1191035. PMC 2929271 . PMID  20647425. 
  50. ^ Chowdhury F, Li Y, Poh YC, Yokohama-Tamaki T, Wang N, Tanaka TS (diciembre de 2010). Zhou Z (ed.). "Los sustratos blandos promueven la autorrenovación homogénea de las células madre embrionarias mediante la regulación negativa de las tracciones célula-matriz". PLOS ONE . ​​5 (12): e15655. Bibcode :2010PLoSO...515655C. doi : 10.1371/journal.pone.0015655 . PMC 3001487 . PMID  21179449. 
  51. ^ Engler AJ, Sen S, Sweeney HL, Discher DE (agosto de 2006). "La elasticidad de la matriz dirige la especificación del linaje de células madre". Cell . 126 (4): 677–689. doi : 10.1016/j.cell.2006.06.044 . PMID  16923388.
  52. ^ Paszek MJ, Zahir N, Johnson KR, Lakins JN, Rozenberg GI, Gefen A, et al. (Septiembre de 2005). "Homeostasis tensional y fenotipo maligno". Célula cancerosa . 8 (3): 241–254. doi : 10.1016/j.ccr.2005.08.010 . PMID  16169468.
  53. ^ Levental KR, Yu H, Kass L, Lakins JN, Egeblad M, Erler JT, et al. (noviembre de 2009). "La reticulación de la matriz fuerza la progresión tumoral al mejorar la señalización de la integrina". Cell . 139 (5): 891–906. doi :10.1016/j.cell.2009.10.027. PMC 2788004 . PMID  19931152. 
  54. ^ Tilghman RW, Cowan CR, Mih JD, Koryakina Y, Gioeli D, Slack-Davis JK, et al. (septiembre de 2010). Hotchin NA (ed.). "La rigidez de la matriz regula el crecimiento de las células cancerosas y el fenotipo celular". PLOS ONE . ​​5 (9): e12905. Bibcode :2010PLoSO...512905T. doi : 10.1371/journal.pone.0012905 . PMC 2944843 . PMID  20886123. 
  55. ^ Liu F, Mih JD, Shea BS, Kho AT, Sharif AS, Tager AM, Tschumperlin DJ (agosto de 2010). "Amplificación por retroalimentación de la fibrosis a través del endurecimiento de la matriz y la supresión de COX-2". The Journal of Cell Biology . 190 (4): 693–706. doi :10.1083/jcb.201004082. PMC 2928007 . PMID  20733059. 
  56. ^ Wipff PJ, Rifkin DB, Meister JJ, Hinz B (diciembre de 2007). "La contracción de miofibroblastos activa el TGF-beta1 latente de la matriz extracelular". The Journal of Cell Biology . 179 (6): 1311–1323. doi :10.1083/jcb.200704042. PMC 2140013 . PMID  18086923. 
  57. ^ Georges PC, Hui JJ, Gombos Z, McCormick ME, Wang AY, Uemura M, et al. (diciembre de 2007). "La mayor rigidez del hígado de rata precede a la deposición de matriz: implicaciones para la fibrosis". American Journal of Physiology. Fisiología gastrointestinal y hepática . 293 (6): G1147–G1154. doi :10.1152/ajpgi.00032.2007. PMID  17932231. S2CID  201357.
  58. ^ Li L, Sharma N, Chippada U, Jiang X, Schloss R, Yarmush ML, Langrana NA (mayo de 2008). "Modulación funcional de células de linaje de hepatocitos derivadas de ES a través de la alteración de la conformidad con el sustrato". Anales de ingeniería biomédica . 36 (5): 865–876. doi :10.1007/s10439-008-9458-3. PMID  18266108. S2CID  21773886.
  59. ^ Semler EJ, Lancin PA, Dasgupta A, Moghe PV (febrero de 2005). "Ingeniería de la morfogénesis y la función hepatocelular a través de hidrogeles presentadores de ligando con flexibilidad mecánica graduada". Biotecnología y bioingeniería . 89 (3): 296–307. doi :10.1002/bit.20328. PMID  15744840.
  60. ^ Friedland JC, Lee MH, Boettiger D (enero de 2009). "El interruptor de integrina activado mecánicamente controla la función de alfa5beta1". Science . 323 (5914): 642–644. Bibcode :2009Sci...323..642F. doi :10.1126/science.1168441. PMID  19179533. S2CID  206517419.
  61. ^ Chan CE, Odde DJ (diciembre de 2008). "Dinámica de tracción de filopodios en sustratos flexibles". Science . 322 (5908): 1687–1691. Bibcode :2008Sci...322.1687C. doi :10.1126/science.1163595. PMID  19074349. S2CID  28568350.
  62. ^ Dupont S, Morsut L, Aragona M, Enzo E, Giulitti S, Cordenonsi M, et al. (junio de 2011). "El papel de YAP/TAZ en la mecanotransducción". Nature . 474 (7350): 179–183. doi :10.1038/nature10137. hdl : 11380/673649 . PMID  21654799. S2CID  205225137.
  63. ^ "drug [email protected]". Nature.com . Consultado el 26 de marzo de 2013 .
  64. ^ Duell BL, Cripps AW, Schembri MA, Ulett GC (2011). "Modelos de cocultivo de células epiteliales para el estudio de enfermedades infecciosas: beneficios y limitaciones". Journal of Biomedicine & Biotechnology . 2011 : 852419. doi : 10.1155/2011/852419 . PMC 3189631 . PMID  22007147. 
  65. ^ Barrila J, Radtke AL, Crabbé A, Sarker SF, Herbst-Kralovetz MM, Ott CM, Nickerson CA (noviembre de 2010). "Modelos de cultivo celular en 3D organotípicos: uso de un recipiente de pared giratoria para estudiar las interacciones entre hospedador y patógeno". Nature Reviews. Microbiology . 8 (11): 791–801. doi : 10.1038/nrmicro2423 . PMID  20948552. S2CID  6925183.
  66. ^ Mapanao AK, Voliani V (junio de 2020). "Modelos tumorales tridimensionales: promoción de avances en la investigación traslacional en nanoteranósticos". Applied Materials Today . 19 : 100552. doi :10.1016/j.apmt.2019.100552. S2CID  213634060.
  67. ^ Cassano D, Santi M, D'Autilia F, Mapanao AK, Luin S, Voliani V (2019). "Efecto fototérmico mediante arquitecturas ultrapequeñas en nano excretables con respuesta NIR". Horizontes de Materiales . 6 (3): 531–537. doi : 10.1039/C9MH00096H . hdl : 11384/77439 . ISSN  2051-6347.
  68. ^ Edmondson R, Broglie JJ, Adcock AF, Yang L (mayo de 2014). "Sistemas de cultivo celular tridimensionales y sus aplicaciones en el descubrimiento de fármacos y biosensores basados ​​en células". Tecnologías de desarrollo de fármacos y ensayos . 12 (4): 207–218. doi :10.1089/adt.2014.573. PMC 4026212. PMID  24831787 . 
  69. ^ Bhattacharya M, Malinen MM, Lauren P, Lou YR, Kuisma SW, Kanninen L, et al. (diciembre de 2012). "El hidrogel de celulosa nanofibrilar promueve el cultivo de células hepáticas tridimensionales". Journal of Controlled Release . 164 (3): 291–298. doi : 10.1016/j.jconrel.2012.06.039 . PMID  22776290.
  70. ^ DeRosa MC, Monreal C, Schnitzer M, Walsh R, Sultan Y (febrero de 2010). "Nanotecnología en fertilizantes". Nature Nanotechnology . 5 (2): 91. Bibcode :2010NatNa...5...91D. doi : 10.1038/nnano.2010.2 . PMID  20130583.
  71. ^ Hsiao AY, Tung YC, Qu X, Patel LR, Pienta KJ, Takayama S (mayo de 2012). "Las matrices de 384 gotas colgantes proporcionan excelentes factores Z y permiten la formación versátil de esferoides de cocultivo". Biotecnología y bioingeniería . 109 (5): 1293–1304. doi :10.1002/bit.24399. PMC 3306496 . PMID  22161651. 
  72. ^ Mapanao AK, Santi M, Faraci P, Cappello V, Cassano D, Voliani V (septiembre de 2018). "Arquitecturas ultrapequeñas en nanopartículas activables endógenamente: evaluación de la focalización en esferoides de carcinoma pancreático tridimensionales". ACS Omega . 3 (9): 11796–11801. doi :10.1021/acsomega.8b01719. PMC 6173554 . PMID  30320273. 
  73. ^ Ghosh S, Börsch A, Ghosh S, Zavolan M (abril de 2021). "El panorama transcripcional de una línea celular de hepatoma cultivada en estructuras de proteínas de la matriz extracelular". BMC Genomics . 22 (1): 238. doi : 10.1186/s12864-021-07532-2 . PMC 8025518 . PMID  33823809. 
  74. ^ Fontoura JC, Viezzer C, Dos Santos FG, Ligabue RA, Weinlich R, Puga RD, et al. (febrero de 2020). "Comparación de modelos de cultivo celular 2D y 3D para el crecimiento celular, la expresión génica y la resistencia a fármacos". Ciencia e ingeniería de materiales. C, Materiales para aplicaciones biológicas . 107 : 110264. doi : 10.1016/j.msec.2019.110264. hdl : 10923/20413 . PMID  31761183. S2CID  208277016.
  75. ^ Habanjar O, Diab-Assaf M, Caldefie-Chezet F, Delort L (noviembre de 2021). "Sistemas de cultivo celular 3D: aplicación en tumores, ventajas y desventajas". Revista internacional de ciencias moleculares . 22 (22): 12200. doi : 10.3390/ijms222212200 . PMC 8618305 . PMID  34830082. 
  76. ^ Tibbitt MW, Anseth KS (julio de 2009). "Hidrogeles como imitadores de la matriz extracelular para el cultivo celular en 3D". Biotecnología y bioingeniería . 103 (4): 655–663. doi :10.1002/bit.22361. PMC 2997742. PMID  19472329 . 
  77. ^ "Crean una vacuna rápida contra la gripe aviar". Wired . Reuters. 26 de enero de 2006 . Consultado el 31 de enero de 2010 .
  78. ^ Gao W, Soloff AC, Lu X, Montecalvo A, Nguyen DC, Matsuoka Y, et al. (febrero de 2006). "Protección de ratones y aves de corral contra el letal virus de la influenza aviar H5N1 mediante inmunización basada en adenovirus". Revista de Virología . 80 (4): 1959-1964. doi :10.1128/JVI.80.4.1959-1964.2006. PMC 1367171 . PMID  16439551. 
  79. ^ "NIAID recurre a Chiron para desarrollar una vacuna contra la gripe aviar H9N2". Instituto Nacional de Alergias y Enfermedades Infecciosas (NIAID) . 17 de agosto de 2004. Consultado el 31 de enero de 2010 .
  80. ^ Miki, Yasuhiro; Ono, Katsuhiko; Hata, Shuko; Suzuki, Takashi; Kumamoto, Hiroyuki; Sasano, Hironobu (septiembre de 2012). "Las ventajas del cocultivo sobre el cultivo de células mono en la simulación del entorno in vivo". The Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology . 131 (3–5): 68–75. doi :10.1016/j.jsbmb.2011.12.004. ISSN  0960-0760. PMID  22265957. S2CID  19646957.
  81. ^ Paschos, Nikolaos K.; Brown, Wendy E.; Eswaramoorthy, Rajalakshmanan; Hu, Jerry C.; Athanasiou, Kyriacos A. (3 de febrero de 2014). "Avances en ingeniería de tejidos mediante cocultivo basado en células madre". Revista de ingeniería de tejidos y medicina regenerativa . 9 (5): 488–503. doi : 10.1002/term.1870 . ISSN  1932-6254. PMID  24493315. S2CID  1991776.
  82. ^ Dittrich, Petra S.; Manz, Andreas (marzo de 2006). "Laboratorio en un chip: microfluídica en el descubrimiento de fármacos". Nature Reviews Drug Discovery . 5 (3): 210–218. doi :10.1038/nrd1985. ISSN  1474-1784. PMID  16518374. S2CID  35904402.
  83. ^ Terrell, John A.; Jones, Curtis G.; Kabandana, Giraso Keza Monia; Chen, Chengpeng (2020). "De células en un chip a órganos en un chip: materiales de andamiaje para cultivo celular 3D en microfluídica". Journal of Materials Chemistry B . 8 (31): 6667–6685. doi :10.1039/D0TB00718H. hdl : 11603/21825 . PMID  32567628. S2CID  219972841.
  84. ^ Wu, Qirui; Liu, Jinfeng; Wang, Xiaohong; Feng, Lingyan; Wu, Jinbo; Zhu, Xiaoli; Wen, Weijia; Gong, Xiuqing (12 de febrero de 2020). "Órgano en un chip: avances recientes y perspectivas de futuro". Ingeniería Biomédica en Línea . 19 (1): 9. doi : 10.1186/s12938-020-0752-0 . ISSN  1475-925X. PMC 7017614 . PMID  32050989. 
  85. ^ Leung, Chak Ming; de Haan, Pim; Ronaldson-Bouchard, Kacey; Kim, Ge-Ah; Ko, Jihoon; Rho, Hoon Suk; Chen, Zhu; Habibovich, Pamela; Jeon, Noo Li; Takayama, Shuichi; Shuler, Michael L.; Vunjak-Novakovic, Gordana; Frey, Olivier; Verpoorte, Elisabeth; Toh, Yi-Chin (12 de mayo de 2022). "Una guía para el órgano en un chip". Imprimaciones de métodos de reseñas de la naturaleza . 2 (1): 1–29. doi : 10.1038/s43586-022-00118-6 . ISSN  2662-8449. S2CID  248756548.
  86. ^ Ma, Chao; Peng, Yansong; Li, Hongtong; Chen, Weiqiang (febrero de 2021). "Órgano en un chip: un nuevo paradigma para el desarrollo de fármacos". Tendencias en ciencias farmacológicas . 42 (2): 119–133. doi :10.1016/j.tips.2020.11.009. PMC 7990030 . PMID  33341248. 
  87. ^ Rapanan JL, Cooper KE, Leyva KJ, Hull EE (agosto de 2014). "Migración celular colectiva de queratocitos primarios de pez cebra". Experimental Cell Research . 326 (1): 155–165. doi :10.1016/j.yexcr.2014.06.011. PMID  24973510.
  88. ^ Lee J, Jacobson K (noviembre de 1997). "La composición y dinámica de las adherencias entre células y sustrato en queratocitos de peces en movimiento". Journal of Cell Science . 110 (22): 2833–2844. doi :10.1242/jcs.110.22.2833. PMID  9427291.
  89. ^ Drugmand JC, Schneider YJ, Agathos SN (2012). "Células de insectos como fábricas de biofabricación". Avances en biotecnología . 30 (5): 1140–1157. doi :10.1016/j.biotechadv.2011.09.014. PMID  21983546.
  90. ^ Hunt P, Robertson D, Weiss D, Rennick D, Lee F, Witte ON (marzo de 1987). "Un único tipo de célula estromal derivada de la médula ósea sustenta el crecimiento in vitro de células mieloides y linfoides tempranas". Cell . 48 (6): 997–1007. doi :10.1016/0092-8674(87)90708-2. PMID  2435412. S2CID  31499611.
  91. ^ van den Berg-Bakker CA, Hagemeijer A, Franken-Postma EM, Smit VT, Kuppen PJ, van Ravenswaay Claasen HH, et al. (febrero de 1993). "Establecimiento y caracterización de 7 líneas celulares de carcinoma de ovario y una línea celular de tumor de granulosa: características de crecimiento y citogenética". Revista Internacional de Cáncer . 53 (4): 613–620. doi :10.1002/ijc.2910530415. PMID  8436435. S2CID  6182244.
  92. ^ Lee YG, Korenchuk S, Lehr J, Whitney S, Vessela R, Pienta KJ (2001). "Establecimiento y caracterización de una nueva línea celular de cáncer de próstata humano: DuCaP". In Vivo . 15 (2): 157–162. PMID  11317521.
  93. ^ Ou D, Mitchell LA, Décarie D, Tingle AJ, Nepom GT (marzo de 1998). "Reconocimiento promiscuo de células T de un epítopo de proteína de la cápside de la rubéola restringido por moléculas DRB1*0403 y DRB1*0901 que comparten un supertipo HLA DR". Inmunología humana . 59 (3): 149–157. doi :10.1016/S0198-8859(98)00006-8. PMID  9548074.

Lectura adicional

  • Pacey L, Stead S, Gleave J, Tomczyk K, Doering L (2006). "Cultivo de células madre neuronales: generación de neuroesferas, análisis microscópico y criopreservación". Intercambio de protocolos . doi : 10.1038/nprot.2006.215 .
  • Gilabert JA, Montalvo GB, Artalejo AR (2006). "Cultivos primarios de células cromafines de rata: estandarización y evaluación de la calidad para ensayos de células individuales". Intercambio de protocolos . doi : 10.1038/nprot.2006.294 .
  • Losardo RJ, Gutiérrez RC, Prates JC, Moscovici M, Torres AR, Martínez MA (2015). "Sergey Fedoroff: Un pionero de la regeneración neuronal. Homenaje de la Asociación Panamericana de Anatomía". Revista Internacional de Morfología . 33 (2): 794–800. doi : 10.4067/S0717-95022015000200059 .
  • MacLeod RA, Dirks WG, Matsuo Y, Kaufmann M, Milch H, Drexler HG (noviembre de 1999). "Contaminación cruzada intraespecífica generalizada de líneas celulares tumorales humanas que surge en la fuente". Revista Internacional del Cáncer . 83 (4): 555–563. doi : 10.1002/(SICI)1097-0215(19991112)83:4<555::AID-IJC19>3.0.CO;2-2 . PMID  10508494.
  • Masters JR (abril de 2002). "Células HeLa 50 años después: lo bueno, lo malo y lo feo". Nature Reviews. Cancer . 2 (4): 315–319. doi :10.1038/nrc775. PMID  12001993. S2CID  991019.
  • Witkowski JA (julio de 1983). "Patología experimental y los orígenes del cultivo de tejidos: la contribución de Leo Loeb". Medical History . 27 (3): 269–288. doi :10.1017/S0025727300042964. PMC  1139336 . PMID  6353093.
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  • Repositorios de células Coriell
  • Introducción al cultivo celular. Este seminario web presenta la historia, la teoría, las técnicas básicas y los posibles inconvenientes del cultivo de células de mamíferos.
  • El Centro Nacional de Ciencias Celulares (NCCS), Pune, India; repositorio nacional de líneas celulares/hibridomas, etc.
  • Public Health England Archivado el 7 de junio de 2022 en Wayback Machine , Colecciones de cultivos de Public Health England (ECACC)
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