Proteína G

La proteína G es una proteína de unión a inmunoglobulina expresada en bacterias estreptocócicas del grupo C y G, de forma muy similar a la proteína A, pero con diferentes especificidades de unión. Es una proteína de superficie celular de ~60 kDa (65 kDa para la cepa G148 y 58 kDa para la cepa C40) ^[1] que ha encontrado aplicación en la purificación de anticuerpos a través de su unión a la región Fab y Fc . La molécula nativa también se une a la albúmina , pero debido a que la albúmina sérica es un contaminante importante de las fuentes de anticuerpos, el sitio de unión de la albúmina se ha eliminado de las formas recombinantes de la proteína G. Esta proteína G recombinante, ya sea marcada con un fluoróforo o una cadena de ADN monocatenaria, se utilizó como reemplazo de anticuerpos secundarios en inmunofluorescencia e imágenes de súper resolución. ^[2]

Además de la proteína G, otras proteínas bacterianas que se unen a las inmunoglobulinas, como la proteína A , la proteína A/G y la proteína L, se utilizan habitualmente para purificar, inmovilizar o detectar inmunoglobulinas. Cada una de estas proteínas que se unen a las inmunoglobulinas tiene un perfil de unión de anticuerpos diferente en términos de la porción del anticuerpo que se reconoce y la especie y el tipo de anticuerpos a los que se unirá.

Una simulación ab initio del dominio B1 de la proteína G demuestra que, como sugirieron resultados anteriores, esta proteína inicia el plegamiento a través de un evento de nucleación en los residuos centrales hidrofóbicos seguido de pequeños ajustes. ^[3] Los eventos de plegamiento son los siguientes:

1. Se forma una horquilla β , estabilizada por los residuos W43, Y45 y F52.
2. Los contactos residuales entre el residuo F30, en una hélice α , y la horquilla β se fortalecen.
3. La nucleación de la hoja β se produce a partir de los residuos L5 y F52.
4. El último residuo de nucleación, Y3, ayuda a formar la parte central de la hoja β, dando lugar a una proteína globular .

El dominio GB1 de la proteína G se utiliza a menudo como parte de una proteína de fusión para mantener otros dominios en solución durante experimentos en solución (por ejemplo, RMN ). Muchos dominios previamente insolubles se han vuelto solubles con la fusión del dominio GB1. ^[4] El dominio tiene 56 residuos (aproximadamente 8 kDa) de longitud. En geles SDS-PAGE, el dominio GB1 tiene aproximadamente 13,5 kDa a pesar de tener solo 8 kDa. ^[5]

• Módulo GA