para-Nitrofenilfosfato

*paraca*-Fosfato de nitrofenilo
Nombres
	Nombre IUPAC preferido Fosfato de dihidrógeno de 4-nitrofenilo
	Otros nombres pNPP
Identificadores
Número CAS	330-13-2 Y;
Modelo 3D ( JSmol )	Imagen interactiva;
EBICh	CHEBI:17440 norte;
Química biológica	ChEMBL24231 norte;
Araña química	369 norte;
Tarjeta informativa de la ECHA	100.005.777
Identificador de centro de PubChem	378;
UNIVERSIDAD	59NF9TE3BA Y;
Panel de control CompTox ( EPA )	DTXSID60861876;
	InChI InChI=1S/C6H6NO6P/c8-7(9)5-1-3-6(4-2-5)13-14(10,11)12/h1-4H,(H2,10,11,12) norte Clave: XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N norte; InChI=1/C6H6NO6P/c8-7(9)5-1-3-6(4-2-5)13-14(10,11)12/h1-4H,(H2,10,11,12) Clave: XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYAU;
	SONRISAS C1=CC(=CC=C1[N+](=O)[O-])OP(=O)(O)O;
Propiedades
Fórmula química	C6H6NO6P
Masa molar	219.09
Compuestos relacionados
Compuestos relacionados	Paraoxón
	Salvo que se indique lo contrario, los datos se proporcionan para los materiales en su estado estándar (a 25 °C [77 °F], 100 kPa). norte verificar ( ¿qué es ?)Ynorte Referencias del cuadro de información

Compuesto químico

El para -nitrofenilfosfato ( pNPP ) es un sustrato cromogénico no proteínicopara las fosfatasas alcalinas y ácidas utilizadas en ensayos ELISA y espectrofotométricos convencionales.^[1] Las fosfatasas catalizan la hidrólisis del pNPP liberando fosfato inorgánico y la base conjugada del para -nitrofenol (pNP). El fenolato resultante es amarillo, con una absorción máxima a 405 nm.^[2] Esta propiedad se puede utilizar para determinar la actividad de varias fosfatasas, incluidas la fosfatasa alcalina (AP) y la fosfatasa de tirosina proteica (PTP).^[3]

El PNPP se clasifica como un sustrato cromogénico debido a su capacidad de transformarse de un compuesto incoloro a un compuesto coloreado a través de un mecanismo biológico, la desfosforilación. ^[4] El PNPP se utiliza debido a su bajo costo y la velocidad de las reacciones se puede medir en un amplio rango de concentraciones de sustrato porque la concentración del sustrato no es un factor limitante en la reacción. Las limitaciones del PNPP son que es una molécula pequeña y tal vez no represente por completo las condiciones y estructuras que se encuentran fisiológicamente. ^[5]

Un ensayo de PNPP implica mezclar la muestra con una mezcla que contiene PNPP y dejar que la reacción siga su curso durante un período de tiempo predeterminado. Después de ese punto, el proceso se detiene mediante la adición de una solución de detención, a menudo hecha de un álcali potente como el hidróxido de sodio. ^[6]

La sustancia es sensible a la luz, por lo que debe almacenarse protegida de ella. Esto también es importante después de añadir el sustrato a la mezcla y antes de la lectura. -20 °C es la temperatura óptima de almacenamiento. ^[7]

Para obtener resultados precisos y creíbles, los parámetros del ensayo deben regularse cuidadosamente porque la reacción es sensible a factores como el pH, la temperatura y el grado variable de inhibidores o estimulantes. ^[8]

Referencias

^ Lorenz, Ulrike (7 de mayo de 2017). "Ensayos de fosfatasa de tirosina de proteína". Protocolos actuales en inmunología . 91 (1): 11.7.1–12. doi :10.1002/0471142735.im1107s93. ISBN 978-0471142737. PMC 3097125 . PMID 21462163.
^ MacKintosh, C. (1993). En DG Hardie (Ed.). Fosforilación de proteínas: un enfoque práctico . 221. Nueva York: IRL Press.
^ Matsushima, Ayako; Inoue, Yorinao; Shibata, Kazuo (1975). "Espectrofotometría de absorción derivada de proteínas nativas". Analytical Biochemistry . 65 (1–2): 362–368. doi :10.1016/0003-2697(75)90520-5. ISSN 0003-2697. PMID 1169006.
^ Centro Nacional de Información Biotecnológica (2023). Resumen de compuestos de PubChem para CID 4686862, fosfato de p-nitrofenilo. Recuperado el 14 de mayo de 2023 de https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/p-Nitrofenil-phosphate .
^ Mercan, Fatih; Bennett, Anton M. (julio de 2010). "Análisis de fosfatasas de proteína tirosina y sustratos". Protocolos actuales en biología molecular . 91 (1). doi :10.1002/0471142727.mb1816s91. ISSN 1934-3639. PMC 4351734 .
^ Li, Tong; Zhong, Wen; Jing, Chuanyong; Li, Xuguang; Zhang, Tong; Jiang, Chuanjia; Chen, Wei (21 de julio de 2020). "Hidrolisis mejorada de fosfato de p-nitrofenilo por nanopartículas de (hidr)óxido de hierro: funciones de las facetas expuestas". Environmental Science & Technology . 54 (14): 8658–8667. doi :10.1021/acs.est.9b07473. ISSN 0013-936X.
^ Biolabs, Nueva Inglaterra. «Fosfato de p-nitrofenilo (PNPP) - NEB». www.NEB.com . Consultado el 29 de octubre de 2017 .
^ Terefe, NS; Arimi, JM; VanLoey, A.; Hendrickx, M. (1 de octubre de 2004). "Cinética de la hidrólisis catalizada por fosfatasa alcalina del p-nitrofenilfosfato disódico: efectos de los aditivos de carbohidratos, la baja temperatura y la congelación". Progreso de la biotecnología . 20 (5): 1467–1478. doi :10.1021/bp0498894. ISSN 8756-7938.

Enlaces externos

Sal disódica hexahidratada de pNPP (SigmaAldrich.com)
Productos de la marca Nunc

[1] Lorenz, Ulrike (7 de mayo de 2017). "Ensayos de fosfatasa de tirosina de proteína". Protocolos actuales en inmunología . 91 (1): 11.7.1–12. doi :10.1002/0471142735.im1107s93. ISBN 978-0471142737. PMC 3097125 . PMID 21462163.

[2] MacKintosh, C. (1993). En DG Hardie (Ed.). Fosforilación de proteínas: un enfoque práctico . 221. Nueva York: IRL Press.

[3] Matsushima, Ayako; Inoue, Yorinao; Shibata, Kazuo (1975). "Espectrofotometría de absorción derivada de proteínas nativas". Analytical Biochemistry . 65 (1–2): 362–368. doi :10.1016/0003-2697(75)90520-5. ISSN 0003-2697. PMID 1169006.

[4] Centro Nacional de Información Biotecnológica (2023). Resumen de compuestos de PubChem para CID 4686862, fosfato de p-nitrofenilo. Recuperado el 14 de mayo de 2023 de https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/p-Nitrofenil-phosphate .

[5] Mercan, Fatih; Bennett, Anton M. (julio de 2010). "Análisis de fosfatasas de proteína tirosina y sustratos". Protocolos actuales en biología molecular . 91 (1). doi :10.1002/0471142727.mb1816s91. ISSN 1934-3639. PMC 4351734 .

[6] Li, Tong; Zhong, Wen; Jing, Chuanyong; Li, Xuguang; Zhang, Tong; Jiang, Chuanjia; Chen, Wei (21 de julio de 2020). "Hidrolisis mejorada de fosfato de p-nitrofenilo por nanopartículas de (hidr)óxido de hierro: funciones de las facetas expuestas". Environmental Science & Technology . 54 (14): 8658–8667. doi :10.1021/acs.est.9b07473. ISSN 0013-936X.

[7] Biolabs, Nueva Inglaterra. «Fosfato de p-nitrofenilo (PNPP) - NEB». www.NEB.com . Consultado el 29 de octubre de 2017 .

[8] Terefe, NS; Arimi, JM; VanLoey, A.; Hendrickx, M. (1 de octubre de 2004). "Cinética de la hidrólisis catalizada por fosfatasa alcalina del p-nitrofenilfosfato disódico: efectos de los aditivos de carbohidratos, la baja temperatura y la congelación". Progreso de la biotecnología . 20 (5): 1467–1478. doi :10.1021/bp0498894. ISSN 8756-7938.