Homogeneización (biología)
La homogeneización , en biología celular o biología molecular , es un proceso mediante el cual diferentes fracciones de una muestra biológica se vuelven iguales en composición. Puede ser un signo de enfermedad en histopatología o un proceso intencional en investigación: una muestra homogeneizada es igual en composición en todos sus aspectos, de modo que la eliminación de una fracción no altera la composición molecular general de la muestra restante y es idéntica a la fracción eliminada. La homogeneización inducida en biología suele ir seguida de extracción molecular y diversas técnicas analíticas, como ELISA y Western blot. [1]
Métodos
La homogeneización del tejido en solución se realiza a menudo simultáneamente con la lisis celular . Sin embargo, para evitar la lisis, el tejido (o la colección de células, por ejemplo, de un cultivo celular ) se puede mantener a temperaturas ligeramente superiores a cero para evitar la autólisis y en una solución isotónica para evitar el daño osmótico . [2]
Si es posible congelar el tejido, la criohomogeneización se puede realizar en condiciones "secas", y suele ser el método de elección siempre que se desee recolectar varias clases moleculares distintas (por ejemplo, tanto proteínas como ARN ) de una sola muestra o un conjunto combinado de muestras, o cuando se desea el almacenamiento a largo plazo de parte de la muestra. La criohomogeneización se puede llevar a cabo utilizando un mortero y una mano de mortero superenfriados (enfoque clásico), o el tejido se puede homogeneizar triturándolo hasta convertirlo en un polvo fino dentro de una bolsa de plástico limpia apoyada contra un bloque de metal sólido superenfriado [3] (técnica desarrollada más recientemente y más eficiente).
La homogeneización a alta presión se utiliza para aislar el contenido de bacterias Gram-positivas , ya que estas células son excepcionalmente resistentes a la lisis, y puede combinarse con la esterilización a alta temperatura. [4]
La homogeneización de Dounce es una técnica adecuada para tejidos blandos de mamíferos, mientras que la lisis de células de mamíferos también se ha demostrado mediante centrifugación. [5]
Referencias
- ^ Schmidt SD, Nixon RA, Mathews PM (2012). "Procesamiento de tejidos previo al análisis de proteínas y metabolitos asociados a la enfermedad de Alzheimer, incluido Aβ". Proteínas amiloides . Métodos en biología molecular. Vol. 849. págs. 493–506. doi :10.1007/978-1-61779-551-0_33. ISBN . 978-1-61779-550-3. Número de identificación personal 22528111.
- ^ Chang, Ta-Yuan; Limanek, James S.; Chang, Catherine CY (1 de septiembre de 1981). "Un procedimiento simple y eficiente para la homogeneización rápida de células animales cultivadas en monocapa". Analytical Biochemistry . 116 (2): 298–302. doi :10.1016/0003-2697(81)90360-2. PMID 6119045.
- ^ von Ziegler, Lukas M.; Saab, Bechara J.; Mansuy, Isabelle M. (27 de marzo de 2013). "Un método simple y rápido para la criohomogeneización de tejidos que permite la extracción molecular multifacética". Journal of Neuroscience Methods . 216 (2): 137–41. doi :10.1016/j.jneumeth.2013.03.005. PMID 23541735. S2CID 34417825.
- ^ Wuytack, Elke Y; Diels, Ann MJ; Michiels, Chris W (1 de agosto de 2002). "Inactivación bacteriana mediante homogeneización a alta presión y alta presión hidrostática". Revista internacional de microbiología de los alimentos . 77 (3): 205–212. doi :10.1016/S0168-1605(02)00054-5. PMID 12160080.
- ^ Singh, Kaustub; Gupta, Ankur; Buchner, Abel John; Ibis, Fatma; Pronk, Joachim W.; Tam, Daniel; Eral, Huseyin Burak (1 de julio de 2019). "Análisis de la homogeneización centrífuga y sus aplicaciones para la emulsificación y la lisis celular mecánica". Journal of Colloid and Interface Science . 547 : 127–135. Bibcode :2019JCIS..547..127S. doi :10.1016/j.jcis.2019.03.036. PMID 30952074. S2CID 96448552.
