Azul de metileno eosina
El azul de metileno eosina ( EMB , también conocido como " fórmula de Levine ") es un medio selectivo y diferencial utilizado para la identificación de bacterias Gram-negativas , [1] específicamente las Enterobacteriaceae . El EMB inhibe el crecimiento de la mayoría de las bacterias Gram-positivas . El EMB se utiliza a menudo para confirmar la presencia de coliformes en una muestra. Contiene dos colorantes, eosina y azul de metileno en una proporción de 6:1. El EMB es un medio microbiológico diferencial , que inhibe el crecimiento de bacterias Gram-positivas y diferencia las bacterias que fermentan la lactosa (p. ej., E. coli ) de las que no lo hacen (p. ej., Salmonella , Shigella ). [2] Los organismos que fermentan la lactosa aparecen oscuros/negros o verdes a menudo con "colonias nucleadas" (colonias con centros oscuros). [3] Los organismos que no fermentan la lactosa aparecerán rosados y a menudo mucoides.
Este medio de cultivo es importante en los laboratorios médicos porque permite la identificación de microbios bacterianos entéricos en un corto período de tiempo. [4]
- La rápida fermentación de la lactosa produce ácidos que reducen el pH, lo que favorece la absorción del colorante por parte de las colonias, que ahora tienen un color morado oscuro.
- Los no fermentadores de lactosa pueden aumentar el pH mediante la desaminación de las proteínas. Esto garantiza que el colorante no se absorba. Las colonias serán incoloras.
Si se cultiva E. coli en medio de cultivo electrolítico , este medio adquiere un brillo verde metálico característico (debido a las propiedades metacromáticas de los colorantes, al movimiento de E. coli mediante flagelos y a los productos finales de la fermentación que son fuertemente ácidos). Algunas especies de Citrobacter y Enterobacter también reaccionan de esta manera al medio de cultivo electrolítico. [5] Este medio ha sido diseñado específicamente para desalentar el crecimiento de bacterias grampositivas. [6]
EMB contiene los siguientes ingredientes: peptona, lactosa , fosfato dipotásico , eosina Y (colorante), azul de metileno (colorante) y agar .
También existen agares EMB que no contienen lactosa.
Referencias
- ^ Levine, M (1918). "Diferenciación de B. coli y B. aerogenes en un agar eosina-azul de metileno simplificado". J Infect Dis . 23 : 43–47. doi :10.1086/infdis/23.1.43.
- ^ ""Explicación de las pruebas bioquímicas"". Archivado desde el original el 15 de febrero de 2009. Consultado el 24 de diciembre de 2008 .
- ^ "Medios diferenciales (formulación de Levine)". Archivado desde el original el 11 de diciembre de 2008. Consultado el 24 de diciembre de 2008 .
- ^ Bachoon, Dave S. y Wendy A. Dustman. Manual de laboratorio de microbiología. Ed. Michael Stranz. Mason, OH: Cengage Learning, 2008. Ejercicio 8, "Medios selectivos y diferenciales para aislamiento".
- ^ "Ejemplos de crecimiento en agar EMB". Archivado desde el original el 22 de enero de 2009. Consultado el 24 de diciembre de 2008 .
- ^ "Protocolo de placas de agar eosina-azul de metileno". 29 de septiembre de 2007. Archivado desde el original el 30 de noviembre de 2011.
Enlaces externos
- Usos del agar EMB [ enlace muerto permanente ]
- Historia del agar EMB
- Acumedia - Agar EMB Archivado el 29 de junio de 2015 en Wayback Machine.
- El científico - Explicación del EMB
- Agar EMB de Microbugz
