Enzima de mella
Una enzima de corte (o endonucleasa de corte ) es una enzima que corta una hebra de ADN o ARN bicatenario [1] en una secuencia de nucleótidos de reconocimiento específica conocida como sitio de restricción . Estas enzimas hidrolizan (cortan) solo una hebra del dúplex de ADN, para producir moléculas de ADN que están “ cortadas ”, en lugar de escindidas. [2] [3]
Se pueden utilizar para la amplificación por desplazamiento de cadena, [4] reacción de amplificación de enzimas de mellado , degradación exonucleolítica, la creación de pequeños huecos, [5] o traducción de mellas . [6] El último proceso se ha utilizado con éxito para incorporar nucleótidos marcados radiactivamente y nucleótidos fluorescentes que permiten estudiar regiones específicas en un ADN de doble cadena. [6] [7] Se han estudiado más de 200 enzimas de mellado, y 13 de ellas están disponibles comercialmente [8] y se utilizan rutinariamente para investigación y en productos comerciales.
Referencias
- ^ Wang X, Zhu B (22 de mayo de 2024). "SARS-CoV-2 nsp15 degrada preferentemente dsRNA rico en AU a través de su actividad de nickasa de dsRNA". Investigación de ácidos nucleicos . 52 (9): 5257–5272. doi :10.1093/nar/gkae290. PMC 11109939 . PMID 38634805.
- ^ Ando T; et al. (julio de 1969). "Aislamiento y caracterización de enzimas con acción de corte de Escherichia coli infectada con el fago T4". J. Biochem . 66 (1): 1–10. doi :10.1093/oxfordjournals.jbchem.a129107. PMID 4309718.
- ^ Morgan RD, Kong H, et al. (noviembre de 2000). "Caracterización de la actividad específica de corte de ADN de la endonucleasa de restricción N.BstNBI". Biol. Chem . 381 (11): 1123–5. doi :10.1515/BC.2000.137. PMID 11154070. S2CID 22472698.
- ^ Walker GT, Little MC, Nadeau JG, Shank DD (enero de 1992). "Amplificación in vitro isotérmica de ADN mediante un sistema de enzima de restricción/ADN polimerasa". Proc. Natl. Sci. EE. UU . . 89 (1): 392–6. Bibcode :1992PNAS...89..392W. doi : 10.1073/pnas.89.1.392 . PMC 48243 . PMID 1309614.
- ^ Wang H, Hays JB (octubre de 2001). "Preparación sencilla y rápida de ADN plasmídico con huecos para la incorporación de oligómeros que contienen lesiones específicas del ADN". Mol. Biotechnol . 19 (2): 133–40. doi :10.1385/MB:19:2:133. PMID 11725483. S2CID 22156627.
- ^ ab Rigby PW, Dieckmann M, Rhodes C, Berg P (junio de 1977). "Etiquetado de ácido desoxirribonucleico para una alta actividad específica in vitro mediante la traducción de mellas con la ADN polimerasa I". J. Mol. Biol . 113 (1): 237–51. doi :10.1016/0022-2836(77)90052-3. PMID 881736.
- ^ Jo K, Dhingra DM, Odijk T, de Pablo JJ, Graham MD, Runnheim R, Forrest D, Schwartz DC (2007). "Un sistema de código de barras de una sola molécula que utiliza nanorendijas para el análisis de ADN". Proc. Natl. Sci. EE. UU . . 104 (8): 2673–8. Bibcode :2007PNAS..104.2673J. doi : 10.1073/pnas.0611151104 . PMC 1815240 . PMID 17296933.
- ^ "Enzimas REBASE". Enciclopedia de enzimas de restricción y de corte . Consultado el 1 de junio de 2009 .
Enlaces externos
- Enzimas de corte de New England Biolabs
- Enzimas de corte de Fermentas
