Elución
En química analítica y orgánica , la elución es el proceso de extraer un material de otro mediante el lavado con un solvente: lavado de resinas de intercambio iónico cargadas para eliminar los iones capturados , o elución de proteínas u otros biopolímeros de una electroforesis en gel o una columna de cromatografía .
En un experimento de cromatografía líquida , por ejemplo, un analito generalmente es adsorbido ("unido") por un adsorbente en una columna de cromatografía líquida. El adsorbente, una fase sólida, llamada "fase estacionaria", es un polvo que recubre un soporte sólido. Según la composición de un adsorbente, puede tener distintas afinidades para "adherirse" a otras moléculas, formando una película fina sobre la superficie de sus partículas. La elución es entonces el proceso de eliminar analitos del adsorbente haciendo pasar un solvente, llamado "eluyente", a través del complejo adsorbente-analito. A medida que las moléculas de solvente "eluyen", o viajan a través de la columna de cromatografía, pueden pasar por el complejo adsorbente-analito o desplazar el analito uniéndose al adsorbente en su lugar. Después de que las moléculas de solvente desplazan al analito, este puede ser sacado de la columna para su análisis. Es por esto que, cuando la fase móvil, llamada "eluido", sale de la columna, generalmente fluye hacia un detector o es recolectada por un colector de fracciones para su análisis compositivo.
Predecir y controlar el orden de elución es un aspecto clave de los métodos cromatográficos y electroforéticos en columna .
Serie eluotrópica
Una serie eluotrópica es una lista de varios compuestos ordenados según su poder de elución para un adsorbente determinado . El "poder de elución" de un disolvente es en gran medida una medida de lo bien que el disolvente puede "extraer" un analito del adsorbente al que está adherido. Esto suele ocurrir cuando el eluyente se adsorbe en la fase estacionaria, desplazando el analito. Estas series son útiles para determinar los disolventes necesarios para la cromatografía de compuestos químicos. Normalmente, una serie de este tipo progresa desde disolventes no polares, como el n-hexano , hasta disolventes polares como el metanol o el agua . El orden de los disolventes en una serie eluotrópica depende tanto de la fase estacionaria como del compuesto utilizado para determinar el orden.
| Fuerza de adsorción (menos fuertemente adsorbida → más fuertemente adsorbida) | ||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Hidrocarburos saturados; haluros de alquilo | Hidrocarburos insaturados; haluros de alquenilo | Hidrocarburos aromáticos; haluros de arilo | Hidrocarburos polihalogenados | Éteres | Ésteres | Aldehídos y cetonas | Alcoholes | Acidos y bases (aminas) |
| Poder de elución (menor poder de elución → mayor poder de elución) | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Hexano o pentano | Ciclohexano | Benceno | Diclorometano | Cloroformo | Éter (anhidro) | Acetato de etilo (anhidro) | Acetona (anhidra) | Metanol | Etanol | Piridina | Ácido acético | Agua |
Eluyente
El eluyente o eluyente es la parte "portadora" de la fase móvil. Mueve los analitos a través del cromatógrafo . En la cromatografía líquida , el eluyente es el disolvente líquido; en la cromatografía de gases , es el gas portador. [1]
Eluir
El eluato contiene el material analito que emerge del cromatógrafo . Incluye específicamente tanto los analitos como los solutos coeluyentes que pasan a través de la columna, mientras que el eluyente es solo el portador.
Tiempo de elución y volumen de elución
El " tiempo de elución" de un soluto es el tiempo transcurrido entre el inicio de la separación (el momento en el que el soluto entra en la columna) y el momento en el que el soluto se eluye. De la misma manera, el volumen de elución es el volumen de eluyente necesario para provocar la elución. En condiciones estándar para una mezcla conocida de solutos en una determinada técnica, el volumen de elución puede ser información suficiente para identificar los solutos. Por ejemplo, una mezcla de aminoácidos se puede separar mediante cromatografía de intercambio iónico . En un conjunto particular de condiciones, los aminoácidos se eluirán en el mismo orden y con el mismo volumen de elución.
Elución de anticuerpos
La elución de anticuerpos es el proceso de eliminación de anticuerpos que están adheridos a sus objetivos, como la superficie de los glóbulos rojos . Las técnicas incluyen el uso de calor, un ciclo de congelación-descongelación, ultrasonidos, ácidos o solventes orgánicos. Ningún método es el mejor en todas las situaciones. [2]
Véase también
- Cromatografía
- Desorción
- Electroelución
- Elución en gradiente en cromatografía líquida de alta resolución
- Lixiviación
Referencias
- ^ "Libro de Oro de la IUPAC: eluyente". Unión Internacional de Química Pura y Aplicada. doi : 10.1351/goldbook.E02040 . Consultado el 28 de septiembre de 2008 .
{{cite journal}}: Requiere citar revista|journal=( ayuda ) - ^ George H. Roberts (2006). "Técnicas de elución en bancos de sangre" (PDF) . American Medical Technologists (AMT) . Archivado desde el original (PDF) el 2019-07-11 . Consultado el 2020-07-22 .
- Brown, Phillis (2001). Avances en cromatografía . CRC Press . pág. 36. ISBN. 0-8247-0509-2.
Enlaces externos
- Glosario de química
- Serie eluotrópica Archivado el 22 de diciembre de 2015 en Wayback Machine.
