Fraccionamiento celular

Separar los componentes de una célula conservando sus funciones

En biología celular , el fraccionamiento celular es el proceso que se utiliza para separar los componentes celulares , preservando al mismo tiempo las funciones individuales de cada componente. ^[1] Este es un método que se utilizó originalmente para demostrar la ubicación celular de varios procesos bioquímicos . Otros usos del fraccionamiento subcelular son proporcionar una fuente enriquecida de una proteína para una mayor purificación y facilitar el diagnóstico de varios estados patológicos. ^[2]

Homogeneización

El tejido se homogeneiza típicamente en una solución tampón que es isotónica para detener el daño osmótico. Los mecanismos para la homogeneización incluyen molienda, picado, troceado, cambios de presión, choque osmótico , congelación-descongelación y ultrasonidos . Luego, las muestras se mantienen frías para evitar daños enzimáticos. Es la formación de una masa homogénea de células (homogeneizado celular o suspensión celular ). Implica la molienda de células en un medio adecuado en presencia de ciertas enzimas con pH, composición iónica y temperatura correctos. Por ejemplo, la pectinasa que digiere la lámina media entre las células vegetales.

Filtración

Este paso puede no ser necesario dependiendo de la fuente de las células . Sin embargo, es probable que el tejido animal produzca tejido conectivo que se debe eliminar. Por lo general, la filtración se logra vertiendo a través de una gasa o con un filtro de succión y el filtro cerámico de grado correspondiente.

Purificación

La purificación se logra mediante centrifugación diferencial : el aumento secuencial de la fuerza gravitacional da como resultado la separación secuencial de los orgánulos según su densidad .

Véase también

Disrupción celular

Medios para la separación celular por densidad:

Referencias

^ Alberts, B; Johnson, A (2002). Fraccionamiento de células. Biología molecular de la célula. Cuarta edición.
^ Ninfa, Alexander J. (2010). Enfoques fundamentales de laboratorio para bioquímica y biotecnología . Estados Unidos de América: John Wiley & Sons, INC. p. 209. ISBN 978-0-470-08766-4.

[1] Alberts, B; Johnson, A (2002). Fraccionamiento de células. Biología molecular de la célula. Cuarta edición.

[2] Ninfa, Alexander J. (2010). Enfoques fundamentales de laboratorio para bioquímica y biotecnología . Estados Unidos de América: John Wiley & Sons, INC. p. 209. ISBN 978-0-470-08766-4.