Agar chocolate
El medio de agar chocolate no selectivo de la izquierda, conocido como sobrecrecimiento, debido a su composición, permitió el crecimiento de colonias de organismos distintos de los de N. gonorrhoeae , mientras que el medio selectivo de Thayer-Martin de la derecha, que contiene antimicrobianos que inhiben el crecimiento de organismos distintos de N. gonorrhoeae , no muestra sobrecrecimiento, pero es positivo para la bacteria N. gonorrhoeae . (Amplíe la imagen para ver las colonias de N. gonorrhoeae )
El agar chocolate ( CHOC ) o agar sangre chocolate ( CBA ) es un medio de crecimiento enriquecido no selectivo que se utiliza para aislar bacterias patógenas . [1] [2] [3] Es una variante de la placa de agar sangre que contiene glóbulos rojos que se han lisado calentándolos lentamente a 80 °C. El agar chocolate se utiliza para cultivar bacterias respiratorias exigentes , como Haemophilus influenzae y Neisseria meningitidis . [4] Además, algunas de estas bacterias, especialmente H. influenzae , necesitan factores de crecimiento como el dinucleótido de nicotinamida y adenina (factor V o NAD) y la hemina (factor X), que se encuentran dentro de los glóbulos rojos; por lo tanto, un requisito previo para el crecimiento de estas bacterias es la presencia de lisados de glóbulos rojos. El calor también inactiva las enzimas que de otro modo podrían degradar el NAD. El agar recibe su nombre por su color y no contiene productos de chocolate .
Variantes
El agar chocolate con la adición de bacitracina se vuelve selectivo para el género Haemophilus . Otra variante del agar chocolate, llamada agar Thayer-Martin, contiene una variedad de antibióticos que seleccionan especies de Neisseria .
Composición
La composición del agar chocolate incluye los siguientes componentes: [5]
| Ingrediente | Cantidad (gramos por litro) | Objetivo |
|---|---|---|
| Digerido de caseína y tejido animal | 15,0 gramos | Fuente de aminoácidos y péptidos para el crecimiento bacteriano. |
| Maicena | 1,0 gramos | Proporciona carbohidratos como fuente de energía para las bacterias. |
| Cloruro de sodio | 5,0 gramos | Mantiene el equilibrio osmótico en el medio. |
| Fosfato dipotásico | 4,0 gramos | Actúa como un amortiguador de pH para mantener el pH deseado para el crecimiento bacteriano. |
| Fosfato monopotásico | 1,0 gramos | Actúa como un amortiguador de pH para mantener el pH deseado para el crecimiento bacteriano. |
| Solución de hemoglobina al 2% | 500 ml | Aporta hierro y otros nutrientes necesarios para el crecimiento bacteriano. |
| Enriquecimiento de coenzimas | 10 ml | Contiene coenzimas necesarias para vías metabólicas específicas de las bacterias. |
| Agar | 10 gramos | Agente solidificante que permite que el medio forme una superficie sólida para el crecimiento bacteriano. |
Las concentraciones exactas de estos ingredientes pueden variar ligeramente dependiendo de la formulación específica utilizada en diferentes laboratorios o por diferentes fabricantes.
Historia
La adición de sangre calentada a los medios fue documentada por primera vez por Cohen y Fitzgerald en 1910 y luego por la Dra. Olga Povitzky en la Oficina de Laboratorios del Departamento de Salud de la Ciudad de Nueva York . [6] [7] El término "agar chocolate" proviene del color marrón generado por la mayor concentración de sangre calentada en la mezcla y recibió la descripción distintiva por primera vez por Warren Crowe en 1915. [8]
Referencias
- ^ Segen. «Agar chocolate: definición». The Free Dictionary . Consultado el 28 de septiembre de 2012 .
- ^ "Agar chocolate (CHOC)". Sistemas libres de anaerobios . Consultado el 28 de septiembre de 2012 .
- ^ Anderson, Cindy (2013). Grandes aventuras en el laboratorio de microbiología (7.ª ed.). Pearson. pág. 175. ISBN 978-1-269-39068-2.
- ^ Gunn, BA (1984). "Agar chocolate: un medio diferencial para cocos gram positivos". Revista de microbiología clínica . 20 (4): 822–823. doi :10.1128/jcm.20.4.822-823.1984. PMC 271442 . PMID 6490866.
- ^ Redacción (24 de marzo de 2023). «Agar chocolate: composición, preparación y usos | Guía de pruebas de laboratorio» . Consultado el 28 de agosto de 2024 .
- ^ Coca, Arthur F.; Kelley, Margaret F. (1 de enero de 1921). "VI. Un estudio serológico del bacilo de Pfeiffer". Revista de inmunología . 6 (1): 87–101. doi :10.4049/jimmunol.6.1.87. ISSN 0022-1767.
- ^ McLeod, JW; Wheatley, B; Phelon, HV (febrero de 1927). "Sobre algunas de las dificultades inexplicables encontradas en el cultivo del gonococo: el papel desempeñado por los aminoácidos". The British Journal of Exeperimental Pathology . 8 (1): 25–37. PMC 2047973 .
- ^ CROWE, WARREN (1915). "Algunos aspectos del problema de la fiebre cerebroespinal. Con una nota sobre un método para aislar estreptococos de heridas, etc." The Lancet . 186 (4812): 1127–1132. doi :10.1016/s0140-6736(01)56054-7. ISSN 0140-6736.
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