La anexina A5 (o anexina V ) es una proteína celular del grupo de las anexinas . En la citometría de flujo , la anexina V se utiliza habitualmente para detectar células apoptóticas por su capacidad de unirse a la fosfatidilserina , un marcador de apoptosis cuando se encuentra en la capa externa de la membrana plasmática. Se desconoce la función de la proteína; sin embargo, se ha propuesto que la anexina A5 desempeña un papel en la inhibición de la coagulación sanguínea al competir por los sitios de unión de la fosfatidilserina con la protrombina y también para inhibir la actividad de la fosfolipasa A1 . Estas propiedades se han descubierto mediante experimentos in vitro .
Patología
Los anticuerpos dirigidos contra la anexina A5 se encuentran en pacientes con una enfermedad llamada síndrome antifosfolípido (SAF), una enfermedad trombofílica asociada con autoanticuerpos contra compuestos fosfolípidos.
La anexina A5 forma un escudo alrededor de las moléculas de fosfolípidos con carga negativa. La formación de un escudo de anexina A5 bloquea la entrada de fosfolípidos en las reacciones de coagulación . En el síndrome de anticuerpos antifosfolípidos, la formación del escudo se ve interrumpida por los anticuerpos. Sin el escudo, hay una mayor cantidad de moléculas de fosfolípidos en las membranas celulares, lo que acelera las reacciones de coagulación y causa la coagulación sanguínea característica del síndrome de anticuerpos antifosfolípidos. La anexina A5 mostró una regulación positiva en el carcinoma papilar de tiroides . [5]
Uso en laboratorio
La anexina A5 se utiliza como una sonda no cuantitativa para detectar células que han expresado fosfatidilserina (PS) en la superficie celular, un evento que se encuentra en la apoptosis , así como en otras formas de muerte celular. [6] [7] [8] Las plaquetas también exponen PS y PE en su superficie cuando se activan, lo que sirve como sitio de unión para varios factores de coagulación.
El ensayo de afinidad de la anexina A5 normalmente utiliza un conjugado de anexina V y una etiqueta fluorescente o enzimática, biotina u otras etiquetas, o un radioelemento, en un tampón adecuado (la unión de la anexina V a los aminofosfolípidos depende del Ca 2+ ). El ensayo combina la tinción de anexina V de los eventos de membrana de PS y PE con la tinción de ADN en el núcleo celular con yoduro de propidio (PI) o 7-aminoactinomicina D (AAD-7), lo que distingue las células viables de las células apoptóticas y las células necróticas . [9] La detección se produce mediante citometría de flujo o un microscopio de fluorescencia .
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Lectura adicional
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